临床色谱质谱检验技术第四章气相色谱质谱联用技术二.ppt

定义：对选定的某个或数个特征质量峰进行单离子或多离子检测，获得这些离子流强度随时间的变化曲线的扫描。 特点：知道要检测物质的特征离子，质谱图不能用于检索。 选择离子扫描（Selected Ion Monitoring,SIM） 定义：质谱中任何一个质荷比或多个质荷比得到的响应对时间的色谱图 特点：质量色谱图可由全扫描质谱图中提取一种或多种质荷比的离子得到后，通过计算机处理后来实现 质量色谱图（Mass Chromatogram,MC） m/z Retention time TIC MC MS Spectrum 又称为提取离子色谱图（Extract Ion Chromatogram,EIC) TIC: Total Ion Chromatogram 总离子流色谱图 MC: Mass Chromatogram 质量色谱图 谱图认识 MC SIM、scan扫描比较 m/z Retention time TIC : Scan Mode 72 54 152 SIM检测离子 优点：改善峰形；改善精确度；提高灵敏度 SIM、scan扫描灵敏度比较 在scan方式中，扫描300个质量离子，一次扫描循环时间为0.05秒，用于每个质量的采集时间约0.167ms； SIM方式只选择3个离子，一次扫描循环时间同样用0.05秒，则每个质量离子的采集时间为16.7ms，时间增加100倍； 检测时间越长，检测的离子数多，离子强度大，灵敏度越大。 SIM、scan扫描灵敏度比较 检测标样为六氯苯（HCB），全扫的进样量是2pg，选择离子检测的进样量是2fg，图中纵坐标一致，说明选择离子检测的信噪比由于全扫描的信噪比，检出限低几个数量级 质量扫描方式选择比较 定性分析 离子源：EI 质量分析器：四极杆 扫描方式：全扫描 数据分析：谱库检索 定量分析 离子源：EI 质量分析器：四极杆 扫描方式：选择离子扫描 数据分析：峰面积、峰高 标准质谱谱库： 在标准电离条件（电子电离源，70eV电子束轰击）下得到的已知纯化合物的标准质谱图，并将其储存起来。 常用谱库检索： NIST/EPA/NIH通用谱库 Wiley库通用谱库 Maurer/Pfleger/Weber库专用谱库 Chemistation农药库专用谱库 谱库检索 检索方式 在线检索： 预先选定好检索谱库并设定好库检索参数和过滤器后，将扣除本底的质谱图与标准谱库中存在的质谱图进行比较，按照匹配度或相似度从大到小的顺序列出质谱图的相关信息（匹配度或相似度、化合物的名称、分子量、分子式和结构式等），作为被检索质谱图的定性参考依据。 离线检索： 输入化合物的相关信息（CAS登记号、名称、分子式、分子量等），进行计算机检索，得出所需要的质谱图，简单方便且快速 谱库检索 谱图检索信息 谱库检索 Name Molwt Formula Qual 2-Propenoic acid,3-(4-methoxyphenyl)- 206 C12H14O3 99 2-Propenoic acid,3-(4-methoxyphenyl)- 206 C12H14O3 98 Ethyl p-methoxycinnamate 206 C12H14O3 89 2-Propenoic acid,3-(3-methoxyphenyl)- 206 C12H14O3 64 Thiazole,4-phenyl- 161 C9H7NS 47 Thiazole,5-phenyl- 161 C9H7NS 47 1-Penten-3-one,l-(4-methoxyphenyl)-4-me 204 C13H16O2 43 Indenone,5-methylamino-2,3-dihydro- 161 C10H11NO 38 数据库中所存质谱图有限，如果未知物是数据库中没有的化合物，检索结果也给出几个相近的化合物，需要进行仔细鉴别，防止检索出错误的结果。 由于质谱法本身的局限性，一些结构相近的化合物其质谱图也相似，这种情况也可能出现错误的检索结果。 由于色谱峰分离不好以及本底和噪音影响，使得到的质谱图质量不高，这样所得到的检索结果也会出现错误。 谱库检索注意事项 四、小结及思考 《临床色谱质谱检验技术》 气相色谱-质谱联用方法建立流程？ 气相色谱-质谱联用方法中质谱方法建立？ Thanks * * * 气相色谱仪分离样品中各组分，样品各组分由于沸点不同以及在色谱柱上保留性质的差异而实现分离，通过接口依次进入质谱仪的离子源被离子化，离子在质量分析器中按质荷比（m/z）大小依次进入检测器被检测，计算机数据处理系统进行数据采集和处理，技术人员进行结果分析。 真空