五味子乙素抗顺铂所致HK.pdf

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０１４Ｊｕｌ；３０（７）：９６１～４ ·９６１· 网络出版时间：２０１４－６－２４１６：３５　网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｏｉ／１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１４．０７．０１７．ｈｔｍｌ 五味子乙素抗顺铂所致ＨＫ２凋亡及其机制的研究 王嫣虹，徐　翔 （浙江大学医学院附属第二医院滨江院区药剂科，浙江杭州　３１０００９） ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１４．０７．０１７ 化疗中的不良反应提供研究思路。 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－１９７８（２０１４）０７－０９６１－０４ １　实验材料 中国图书分类号：Ｒ２８４１；Ｒ３２２６１；Ｒ３２９２５；Ｒ９７９１ １．１　细胞与药物　人肾皮质近曲小管上皮细胞 摘要：目的　研究五味子乙素（ＳｃｈＢ）对顺铂所致 ＨＫ２（肾 ＨＫ２（ＣＯＤＯ．ＣＯ．ＬＴＤ，货号 ＣＯＤＯ０１８３）。受试药 小管上皮细胞）损伤的保护作用，并探讨其可能的机制。方 物：顺铂（Ｓｉｇｍａ，货号４７９３０６）、五味子乙素（ＳｃｈＢ， 法　不同浓度的ＳｃｈＢ和顺铂作用于ＨＫ２，在倒置显微镜下 纯度＞９９％） 观察细胞形态变化，流式细胞仪检测 ＨＫ２细胞凋亡，并检 １．２　 实验试剂　 ＤＭＥＭ／Ｆ１２培养基 （Ｇｉｂｃｏ， 测细胞ＬＤＨ（乳酸脱氢酶）、ＭＤＡ（丙二醛）、ＬＰＯ（脂质过氧 化物）的改变，探讨ＳｃｈＢ对ＨＫ２保护作用的机制。结果　 Ｌｏｔ１１７１６５７）、０２５％胰酶、ＰＢＳ缓冲液、双抗（吉诺 顺铂有抑制 ＨＫ２生长、诱导其凋亡的作用 ＩＣ 为 １８３９ 生物公司）、胎牛血清（杭州四季青）、二甲基甲酰胺 ５０ －１ －１ （Ｓｉｇｍａ）、ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ细胞凋亡检测试剂盒（凯 ｍｏｌ·Ｌ ，而２０ ｍｏｌ·Ｌ 的ＳｃｈＢ能够明显减少顺铂引 μ μ 起的ＨＫ２的凋亡，保护作用最强；ＳｃｈＢ能使顺铂导致的细 基生物，ＫＧＡ１０７）、细胞丙二醛 ＭＤＡ测试盒（南京 胞ＭＤＡ、ＬＰＯ、ＬＯＨ升高有明显降低。结论　五味子乙素能 建成、乳酸脱氢酶ＬＤＨ测试盒（南京建 够有效的抑制顺铂引起 ＨＫ２的凋亡。机制可能是通过其 成、脂质过氧化物 ＬＰＯ测试盒（南京建 抗氧化作用来抑制顺铂引起的氧化应激反应。 成。 ２　方法 关键词：五味子乙素；顺铂；肾毒性；ＨＫ２；细胞凋亡；氧化应 ２．１　细胞的准备　将 ＨＫ２计数传代至９６孔板， 激 ５％ ＣＯ、３７℃培养箱中孵育至对数生长期，取出待 ２ 测。 　　五味子乙素（ｓｃｈｉｓａｎｄｒｉｎＢ，ＳｃｈＢ）是木兰科植 ２．２　药物的配制　将顺铂和ＳｃｈＢ纯品用少量二甲 物北五味子或华中五味子的干燥成熟果实中木脂素 基甲酰胺溶解成母液，试验时用不含血清和双抗的 类有效成分之一，是一种抗氧化能力很强的中药单 ＤＭＥＭ／Ｆ１２培养基稀