云南花生叶斑病病原菌的分离鉴定木.pdf

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维普资讯 花 生 学报 2003,32(增刊 ):4l5~4l7 .,0啪 aJofPeanutScience,Vo1.32,sup,2003 文章编号:1002-4093(2003)增刊 一0415—03 云南花生叶斑病病原菌的分离鉴定 木 张庆滢,杨丽英 (云南省农业科学院油料作物研究所,云南 昆明650205) 摘要 :对云南省花生的叶斑病病原茵作了分离和鉴定,于花生成熟期从病株的叶部取样分离出花 生叶斑病病菌株 10个 ,经分离、培养和鉴定,结果表 明:4个菌株是 CercosporaarachidicolaHod,3 个菌株是 Phaeoisariopsispersonam(Berk&Curt)V.Arx,回接试验结果表 明:云南花生叶斑病病原 菌为 CercosporaamchidicolaHori和 Phaeoisariopsispersonata(Berk&Curt)V.Arx。 关键词 :花生;早斑病;晚斑病 中图分类号 :$565.2$435.652 文献标识码 :B 花生叶斑病有早斑病和晚斑病两种,在我国它们又分别被称为褐斑病和黑斑病。是世界 上分布最广泛 、最具普遍重要性的花生病害 1【],主要发生在花生成熟期 ,感病花生一般减产 4%~15%,严重时可达 30%以上,国内在花生叶斑病育种上所作的工作较少,一方面是 由于抗 原较为缺乏 ,一方面也是抗性育种的难度很大。 引起 叶斑病的病原在云南省的情况还未见报道。对云南的花生叶斑病病原菌进行分离、 鉴定 ,不仅能为云南省花生种质资源进行抗病性鉴定,发掘新抗源 ,加快抗病育种工作进程提 供科学依据,对我省叶斑病的综合防治技术措施的设计也具有重要意义 。 1 材料与方法 1.1 1共试材料 供试材料为弥勒本地种。于 1999年 8月花生成熟期田间采集病叶,采样用的纸袋及有关 工具 (剪刀、镊子等)均事先灭菌消毒,采样时操作者的手也进行消毒,将样 u1放入采样袋后 , 封 口编号。 1.2 样品的分离、培养和鉴定 1·2·1 病菌的分离和培养 一切按常规无菌操作。选择新近有病状 的植株病叶作为组织 分离材料,将带有病灶的叶剪下约 0.5cm2见方的方块,按下列程序进行表面消毒: 75%N精漂洗 5s——无菌水漂洗 1min——0.1%升汞漂洗 3min——无菌水冲洗 5次2【] 将上述表面消毒后的材料,按编号放入马铃薯葡萄糖 (或蔗糖)平板培养基 (PDA)上, 于 28℃温箱中培养 3~7d即可见方块样 品的刀 口边缘处有菌丝长 出,再进一步纯化,将纯培 ’收稿 日期:2003—08—15 作者简介:张庆滢 (1973一),女,云南巍山人,云南省农业科学院池料作物研究所助理研究员 , 大学 ,主要从事花生弓1育 种 研究。 维普资讯 416 花 生 学 报 32卷 养物转接到PDA斜面上,于28℃温箱中培养 7d,待菌丝长好或长出孢子时,挑取少许菌丝或 孢子,用乳酸石碳酸液制成封片和载片培养观察。注意分生孢子和分生孢子梗状况等,结合原 染病状况及菌落特征按有关文献 【资料进行分类鉴定。 1.2.2 直观制片观察 将感染部分的叶片剪下约0.5cm:的方块放入加有乳酸酚溶液的 试管中,用微火煮沸 30min至叶片透 明,然后制成封片置于显微镜下观察病菌侵入植物组织 细胞 的状况 。 1.3 回接试验 选择无病盆栽幼苗 (每盆4株),取 PDA斜面生长旺盛的菌株制成孢子悬浮液,浓度约 为200倍,显微镜下有孢子 20--30个 /视野,于花生 (弥勒本地种)生长45d后用喷雾器喷雾 接种,每一种菌接种 2盆,套塑料袋在25%保持高湿 24h,并设对照。接种前将花生盆摆好、浇 水,然后覆膜,随后注意观察病菌在叶片上的侵染及生长情况。

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