五味子总RNA提取方法的建立1.pdf

( ) ( ) 第 4 期 总第 10 1 中 国 林 副 特 产 No4 GSN O 10 1 2009 年 8 月 Fore st ByPro duct an d Sp ecialit y in China A ug2009 五味子总 RN A 提取方法的建立1) 1 2 3 闫恩维 ,刘华 ,王玉成 ( 1. 黑龙江省林副特产研究所 ,黑龙江省非木质林产品研发重点实验室 ,牡丹江 1570 11 ; 2 . 大兴安岭松岭林业局森林经营处 ;3 . 东北林业大学林学院) 摘 　要 :五味子是一种多糖含量很高的木本植物 , 由于多糖的干扰 ,其 RN A 制备比较困难 。研究以五 味子的叶片为材料 ,建立了一种稳定的从五味子中分离总 RN A 的方法 。该方法以 C TAB 为基本提取 试剂 ,通过酚 、仿抽提纯化 ,最后应用 LiCl 来沉淀 RN A ,可以在 1h 内提取出纯度高的 RN A 。RN A 质量 可以满足 cDN A 文库构建 、R TPCR 等多种分子生物学研究要求 。 关键词 :RNA 提取 ; 五味子 ; 多糖 ;LiCl 沉淀 A Method f or Isolation of Total RNA f rom Schis a n dr a chi nesis 1 2 3 Yan En wei ,Liu Hua , Wang Yucheng ( 1. Heilongj iang Institute of Forest Byproduct and Speciality , Key laboratory of Forest Byproduct and Speciality , Heilongj iang Mudanj iang 1570 11 ;2 . Daxinganling Forestry management Burean of Songling ;3 . College of Forestry , Northeast Forestry University) Abstract : Schis an d ra chi nes is i s a woody plant which had high level of poly saccharide . Due to t he int erfer ence of polysaccharide , it i s difficult to i solat e RN A from Schis an d ra chi nes is . In t he p resent st udy , a met hod for RN A i solation from leave s of Schis an d ra chi nes is wa s build . Thi s met hod ia a kind of C TAB met hod , u sing p henol and chlorofor m to p urify RN A , and RNA wa s depo sit ed by LiCl , The entire exp er iment can