鼠李糖乳杆菌遗传转化方法的优化.PDFVIP

第 卷第 期 生 物 加 工 过 程 年 月 鼠李糖乳杆菌遗传转化方法的优化 韩 鹿李政王凤寰田平芳谭天伟 北京化工大学 生命科学与技术学院北京 摘 要 采用原生质体电转化和 电转化方法向鼠李糖乳杆菌 中导入外源基因 在培养过程中使 用甘氨酸和青霉素辅助溶菌酶处理细胞制备原生质体 得到 个 的转化子 使用 缓冲液处理细胞 使转 化率稳定达到 个 建立了针对鼠李糖乳杆菌简便高效的转化方法为进一步的基因操作提供了便利 关键词 鼠李糖乳杆菌 基因工程转化 乳酸 中图分类号文献标志码文章编号 乳酸是世界公认的三大有机酸之一 主要用于 界环境具有很强的抵抗力 在基因操作过程中难于 食品医药轻工等行业 乳酸有 乳酸和 乳 接受外源而使转化过程效率低且不稳定 传 酸 种旋光异构体 在食品及医药领域 乳酸的 统的乳杆菌转化方法操作过程复杂应用于鼠李糖 生产和应用具有重要意义 特别是近年来 乳酸 乳杆菌时重复性差 因此建立高效而稳定的转化方 作为生物可降解材料聚乳酸的合成单体受到广泛 法成为亟待解决的问题 本文尝试几种电转化方 关注 目前 发酵生产乳酸的工业菌株主要是米 法 拟建立针对鼠李糖乳杆菌稳定而高效的电转化 根霉和乳杆菌属 由于乳杆菌具有耐酸耐盐耐 体系提高转化率 高温等特点在发酵过程中动力消耗小操作简便 材料与方法 常用在大规模的工业生产过程中 本实验室采 用的鼠李糖乳杆菌 在 高温下发酵 菌株和质粒 可产乳酸 光学纯度达 由于其对外 鼠李糖乳杆菌 为本实验室分离保 收稿日期 基金项目国家重点基础研究发展计划 计划资助项目 国家高技术研究发展计划 计划资助项目 国家自然科学基金资助项目 北京市自 然科学基金资助项目 作者简介韩鹿 女天津人硕士研究生研究方向微生物基因工程谭天伟联系人 教授 第 期 韩鹿等鼠李糖乳杆菌遗传转化方法的优化