医学免疫学精品教学（陈韶）4Ig.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 1974年，Koehler在Milstein位于剑桥的实验室开始博士后研究，两人为研究抗体的多样性，对抗体形成细胞与骨髓瘤细胞进行融合试验。 * * * 单克隆抗体由于纯度高、效价高、特异性强，广泛应用于诊断、治疗、研究。 * 第五节 人工制备抗体 多克隆抗体 （Polyclonal antibody, PAb） 单克隆抗体 （Monoclonal antibody， McAb） 基因工程抗体 （Gentic engineering antibody） * 一、多克隆抗体  1 2 B1 Ab1 ?机体 B2 Ab2  3 B3 Ab3 蛋白质抗原 多种抗体的混合物 存在于血清与体液中  由含多种抗原表位的抗原刺激机体多个B细胞克隆产生的 免疫血清，含多种抗体的混合物，称多克隆抗体。 * 二、单克隆抗体（monoclonal antibody, mAb） 应用杂交瘤技术制备的，由识别一个抗原表位的B细胞克隆所产生的均一的、针对该表位的特异性抗体。 两位科学家（Koehler和Milstein）在1975年首创杂交瘤技术制备mAb，并于1985年获诺贝尔奖。 * * HAT筛选原理 细胞DNA合成一般有两条途径。主要途径是由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，叶酸作为重要的辅酶参与这一合成过程。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经次黄嘌吟磷酸核糖转化酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）的催化作用合成DNA。 细胞融合的选择培养基中有3种关键成分：次黄嘌呤（hypoxanthine，H）、甲氨蝶呤（aminopterin，A）和胸腺嘧啶核苷（thymidine，T），所以取三者的字头称为HAT培养基。甲氨蝶呤是叶酸的拮抗剂，可阻断瘤细胞利用正常途径合成DNA，而融合所用的瘤细胞是经毒性培养基选出的HGPRT-细胞株，所以不能在该培养基中生长。只有融合细胞具有亲代双方的遗传性能，可在HAT培养基中长期存活与繁殖。 * 特点：纯度高，特异性强。 应用：临床检测、抑制器官移植排斥、治疗自身免疫疾病、生物导弹等 缺点：鼠源性McAb 对人来说是异种蛋白，具有免疫原性，从而限制了体内的应用，尤其是抗体导向治疗肿瘤的方法。 * 三、基因工程抗体 根据研究者的意图，在基因水平对Ig分子进行切割，拼接或修饰，甚至是人工合成后导入受体细胞表达产生的新型抗体。 * VL VH CH1 CL VH VL CH1 CL CH2 CH3 CH3 CH2 鼠的V区 人的C区 人-鼠嵌合抗体 * VL VH CH1 CL VH VL CH1 CL CH2 CH3 CH3 CH2 鼠的CDR区 人的C区 及骨架区 改型抗体 * 什么是抗体、免疫球蛋白？单克隆抗体？ADCC、调理作用 免疫球蛋白的结构如何？ 免疫球蛋白有何生物学功能？ * 思考 免疫球蛋白分5类的依据是 A、CH和CL抗原特异性的不同 B、VL抗原特异性不同 C、VH抗原特异性不同 D、CH抗原特异性不同 E、CL抗原特异性不同 Ig结构中，与抗原特异性结合的部位： A. VH B. Fab C.VL+VH D.HVR E. CDR 对人而言，属于同种异型抗原的是 A. 抗毒素 B. Ig C.ABO血型抗原 D.RH血型抗原 E. HLA 个体中针对同一Ag表位产生的不同类别Ab，其结构中有差异的部位是什么？ 个体中针对不同Ag产生的同一类别Ab，其结构有何差异？ * * * * * * * * * * * * * * * 双价，基因工程改造随心所欲：双特异性抗体：一端球形，一端方形：CTL表位