医学免疫学精品教学（陈韶）22 23 免疫诊断与防治.pptVIP

免疫学检测技术 体外抗原抗体结合反应的特点及影响因素 检测抗原或抗体的体外试验 免疫细胞功能的检测 抗原抗体反应特点 抗原抗体反应的特异性 抗原抗体反应的可逆性 抗原抗体反应的可见性抗原抗体比例合适出现肉眼可见IC －－－－凝集物，沉淀物 受温度、PH、电解质影响 凝集反应（agglutination reaction) 沉淀反应(precipitation reaction) 标记物标记技术 1.凝集反应 概念：颗粒性抗原（细菌或细胞等）与相应抗体结合在一定条件下，出现肉眼可见的凝集物。 类型： 直接凝集反应 间接凝集反应 2.沉淀反应 概念：可溶性抗原与相应抗体结合，在 一定条件下形成沉淀物的现象. 可溶性抗原：血清蛋白、外毒素、组织浸出 液、细菌滤液等. 类型： 1）单向琼脂扩散试验 2）双向琼脂扩散试验 3. 免疫标记技术 将已知的抗体或抗原标记上荧光素、酶、放射性核素等示踪物质，通过检测标记物，测定抗体或抗原的方法。 常用标记技术： 1）免疫酶测定(enzyme immunoassay, EIA) 酶联免疫吸附试验(ELISA）?2）免疫荧光技术(immunofluorescence technique) 3）放射免疫测定法(radioimmunoassay, RIA) 4）化学发光物质等 酶免疫测定 用酶标记抗体进行的抗原抗体反应，通过酶作用于底物后显色来判断结果。 抗原抗体反应＋酶促反应 酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA） 将已知抗原或抗体吸附在固相载体表面，再用酶标抗体进行检测的抗原抗体反应。 特点：敏感性高（ng-pg），操作简便 类型：直接法(双抗体夹心法):Ab +Ag + Ab* 间接法:Ag +Ab + 抗Ab* 放射免疫测定法(radioimmunoassay,RIA) 原理：用放射性核素标记抗原或抗体进行免疫学检测的技术 常用放射性核素：125I、131I 应用：测定血清、尿液等液体中的微量抗原或半抗原物资，如激素、药物等。 敏感性很高，应用广泛。 免疫印迹法－Western blotting 病毒 免疫细胞功能的检测 免疫细胞的分离 免疫细胞的功能测定 一、免疫细胞的分离 外周血单个核细胞（PBMC）的分离 淋巴细胞及其亚群的分离和分析 T细胞功能检测： T细胞增殖试验：淋巴细胞转化试验有形态计数法、MTT法和同位素法三种 细胞毒试验：51Cr释放法、凋亡细胞检查法等 细胞因子检测：生物活性测定法等? 皮肤试验（体内法）：OT试验 皮肤试验（结核菌素试验） B细胞功能测定 (1) 单向琼脂扩散试验等测定Ig的含量 (2) 抗体形成细胞测定 溶血空斑形成试验 第23章 免疫学防治 亚单位疫苗：提取病原体有效的免疫原成分制成的疫苗。霍乱亚单位疫苗 合成肽疫苗：用人工合成多肽抗原连接适当载体与佐剂制成的疫苗。 猪口蹄疫合成肽疫苗 基因工程疫苗：利用DNA重组技术制备的只含保护性抗原的纯化疫苗。HBsAg疫苗 DNA重组疫苗：将编码病原体免疫原的基因与细菌质粒构建重组体称为DNA疫苗，可直接免疫机体。 转基因植物疫苗：将编码有效免疫原的基因导入可食用植物细胞的基因组中，免疫原可在植物中稳定的表达和积累，人类和动物通过食入该植物达到免疫接种的目的。 计划免疫 第二节 免疫治疗 利用免疫学原理，针对疾病的发生机 制，人为地调整机体的免疫功能，以达 到治疗目的。 分子治疗 分子疫苗－合成肽疫苗、重组载体疫苗、DNA疫苗.包括肿瘤抗原和微生物抗原疫苗 抗体－免疫血清；单克隆抗体；基因工程抗体. 细胞因子－重组细胞因子；细胞因子拮抗疗法. 抗肿瘤单克隆抗体 细胞治疗 细胞疫苗－肿瘤细胞疫苗、基因修饰的瘤苗、DC疫苗等。 过继免疫－LAK 干细胞移植－分离骨髓、外周血、脐血中的干细胞。 生物应答调节剂与免疫抑制剂 免疫抑制剂 化学合成药物： 1、烷化剂：环磷酰胺 2、抗代谢药：硫唑嘌呤 3、激素：糖皮质激素 真菌代谢产物 1、环孢素A：对TH有较好的选择性抑制作用 2、FK-506：其作用强于环孢素A10-100倍，且与环 孢素A有明显的协同作用。 中药及其有效成分：雷公藤多甙 一、免疫预防 二、免疫治疗