血管紧张素1-7对2型糖尿病大鼠胰岛功能及纤维化的影响及其机制-effects of angiotensin 1 - 7 on islet function and fibrosis in type 2 diabetes rats and its mechanism.docxVIP

血管紧张素（1-7）对2型糖尿病大鼠胰岛功能及纤维化的影响及其机制摘要目的：通过构建2型糖尿病(T2DM)大鼠模型，观察多肽血管紧张素（1-7）[Ang-(1-7)]干预后，大鼠血清血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）含量的变化，胰岛组织转化生长因子β1（TGF-β1）,smad3,以及胶原蛋白I（CollagenⅠ)蛋白和mRNA的改变探讨Ang-(1-7)对2型糖尿病大鼠胰岛局部纤维化的影响及机制，进而为改善2型糖尿病胰岛纤维化提供新的思路。方法：本实验选用36只健康的8周龄wistar雄性大鼠，普通饲料喂养2周后，随机选取12只作为正常对照（NC）组，继续普通饲料喂养。剩余24只则给予高脂高热量喂养，并于8周后给予一次性腹腔注射小剂量STZ（30mg/Kg）构建T2DM大鼠模型，共造模成功20只，随机分为糖尿病（DM）组和Ang-(1-7)干预[Ang-(1-7)]组，每组10只。其中Ang-(1-7)干预组给予300ug.㎏-1.d-1的多肽Ang-(1-7)颈部皮下注射干预8周，DM组同等方式给予等体积的生理盐水干预。干预结束后对各组大鼠的血糖、血清胰岛素、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）以及稳态模型胰岛素抵抗指数（Homa-IR）进行检测。运用免疫组织化学染色法检测胰岛局部TGF-β1，smad3及CollagenⅠ蛋白的表达，并采用彩色病理图像分析系统进行定量分析，同时进行HE染色，观察各组大鼠胰岛组织的结构。采用实时荧光定量（RT）PCR法检测TGF-β1，smad3及CollagenⅠmRNA的表达水平。结果：DM组大鼠较NC组相比：体重明显下降，血糖、血清AngⅡ水平、Homa-IR均明显升高，血清胰岛素分泌减少（均P＜0.05）；胰岛局部TGF-β1，smad3及CollagenⅠ蛋白表达水平分别增加为NC组的3.07倍、2.21倍和2.09倍，mRNA表达水平增加为NC组的3.06倍、2.81倍和3.71倍，且差异均有统计学意义（P＜0.05）；观察胰岛HE染色可见，DM组大鼠胰岛数目减少，结构破坏，胰岛内细胞萎缩、减少，排列紊乱。Ang-(1-7)干预后与DM组相比：胰岛轮廓尚清楚，胰岛细胞数量增加，结构破坏减少，但未完全恢复正常；大鼠除体重无明显变化，血糖、血清AngⅡ水平、Homa-IR均有所降低，血清胰岛素分泌增加（均P＜0.05）；胰岛局部TGF-β1，smad3及CollagenⅠ蛋白表达水平分别减少为DM组的67.39％、78.57％和73.91％，mRNA表达水平减少为DM组的50.31％、67.45％和54.68％，且差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：Ang-(1-7)可以明显改善2型糖尿病大鼠胰岛形态、功能及纤维化，其机制可能是通过下调TGF-β1/smads信号转导通路，改善胰岛素抵抗，增加胰岛β细胞的分泌功能来实现的。关键词：Ang-(1-7)；2型糖尿病；胰岛纤维化；胰岛功能TheimpactandmechanismofAngiotensin-(1-7)onthefunctionandfibrosisofpancreaticisletintype2diabeticratsAbstractObjective:Constructingthetype2diabeticratsmodel.AftertheinterventionofAngiotensin(1-7),observetheratisletmorphologyandfunction,theexpressionoftheserumangiotensinⅡ(angiotensinⅡ,AngⅡ),thechangeofproteinandgeneofthetransform-inggrowthfactorbeta1(TGF-beta1),smad3,andCollagenI(CollagenⅠ)inislettissue.DiscusstheinfluenceandmechanismofAng-(1-7)ontype2diabetesratisletlocalfibrosis,inordertoprovidinganewmethodtoimproveisletfibrosisoftype2diabetes.Methods:36healthymaleWistarrats,aged8weeks,werefeedbystandardlaboratorydietfor2weeks,12ofthemwererandomlyselectedasnormalcontrol(NC)group,begivennormaldiet.Theremaining24werefeedwithhigh-fatandhigh-caloriediet