cpgodn对hepg2细胞及其相关因子的作用分析word格式论文.docxVIP

CpG-ODN concentration (0~3μM), mRNA of Bcl-xL\Bcl-2 has a down-regulationtendency,andBidhasanup-regulationtendency,theratioofBcl-xL/Biddecreased.CellcycleofHepG2ingoodstatechangedlittleinthepresenceof0.5~2.5μMCpG-ODN.Butunder2.5~25μMCpG-ODNtreatment,theG1ratioofHepG2increasedandS+G2/M decreased.WhenCpG-ODNconcentrationraisedupto25~50μM,G1decreasedandS+G2/Mincreased.AfterCpG-ODNstimulationofHepG2inpoorstate,theratioof apoptosisenhancedsignificantly.Conclusion:TheactivationofMyD88signalingpathwayseemstobeoneofthemechanismsthatHepG2cellswerekilledbyCpG-activatedPBMCs,andCaspase-8expressioninHepG2maybeinvolvedinthemoleculemechanismsofPBMCkillingHepG2.TheresultsindicatedthatCpG-ODNhasatendencytoinduceHepG2cellsapoptosisbyinfluencingtheexpressionofBcl-2familymembers,includingBcl-xL,Bcl-2andBid.WhentheCpG-ODNconcentrationwaslow,therewaslittleinfluenceonthenormalHepG2cellcycle,andatthemoderateconcentration,CpG-ODNinhibitedHepG2 cellproliferationtosomedegree,butthehighconcentrationCpG-ODNcouldfacilitateHepG2cellproliferation.Moreover,CpG-ODNhastheabilitytopromotetheunhealthy HepG2cellapoptosis.Keywords:CpG-ODN;TLR9; Tumor;Apoptosis;PCR;Flowcytometry广东药学院学位论文原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，系我个人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。除文中已特别加以标注和致谢的地方外，不包含其它个人或机构已经发表或撰写过的研究成果。对本研究做出贡献的其它个人和集体，均已在文中明确说明和致谢。本人充分意识到本声明的法律结果完全由本人承担。学位论文作者签名：＿＿＿＿＿日期：年月日学位论文使用授权的声明本人完全了解广东药学院有关保留和使用学位论文的规定，学校有权保留和向有关部门或机构送交本论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库，可以采用影印、缩印或其它复印手段保存和汇编本学位论文。必威体育官网网址论文在解密后适用本声明。论文作者签名：＿＿＿＿＿论文导师签名：＿＿＿＿＿日期：年月日前言一、研究背景1、CpG-ODN的发现肿瘤的免疫治疗可追溯至1890年，当时纽约的外科医师WilliamColey观察到给癌症患者注射菌体粗提制剂可使肿瘤明显退缩，但其原因不明。直到20 世纪80 年代，在研究菌体粗提制剂中对肿瘤起作用的活性成分时，发现这种活性来自于菌体的核酸组分。用核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶对核酸进行降解分析，证明真正起作用的是菌体中的脱氧核糖核酸(DNA)[1-3]，通过对DNA 进行部分降解分析，发现40bp 左右或更小的片段就可具备这种活性。序列分析显示，凡具有免疫活性的寡脱氧核苷酸(ODN) 序列中至少含有一个或多个-CG-二核苷酸，因为CG之间是以磷(p)相连的，所以把这种寡脱氧核苷酸序列统称为CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)。基于细菌病毒中的CpG DNA的抗肿瘤效应，人们合成了大量含有一个或多个CpG基序的ODN。为了减少核酸酶对ODN的降解，合成的CpG-ODN通常含有磷硫酰（phosphorothioate，PS）骨架。CpG-ODN的第一次临床试验开始于1999年，并表现出了强大的疫苗佐剂活性[4]。2、CpG-ODN的识别在细菌等病