cppfcpc复合材料对体外人成骨细胞opgrankl系统的影响word格式论文.docxVIP

mgMilligram毫克mRNAMessenger RNA信使核糖核酸PCRPolymerase chain raction聚合酶链反应RT-PCRReverse Transcription Polymerase ChainReaction逆转录聚合酶链反 应RNARibonucleic Acid核糖核酸TdTTerminal deoxynucleotidyl transferase末端脱氧核酸转移 酶dNTPDeoxyribonucelotide triphosphare脱氧核苷酸三磷酸SDSSDS-polyacrylamide gel eletrophroresis聚丙烯酰氨凝胶电 泳SPSSStatistiealpackage for social sciences社 会科学统计软件 包CPPF/CPC 复合材料对体外人成骨细胞 OPG/RANKL 系统的影响硕士研究生：曾凡瑞导师：谭文甫副教授中文摘要目的初步探讨聚磷酸钙纤维/磷酸钙骨水泥复合材料对体外人成骨细胞OPG/RANKL 系统的影响，为其临床应用提供理论依据。方法1.将 CPPF 及 CPC 按质量比 1∶9 均匀混合，按固液比 3∶1 加入固化液， 使之呈均匀稠厚糊状，将其倒入自制的直径 3.0cm，厚度 3mm 的圆柱形模具中，凝 固后消毒备用。2.培养人成骨细胞样细胞系 MG63，调整细胞浓度为 1x105，并接种至含自制 CPPF/CPC 复合材料模块的细胞培养板（骨水泥组）中和普通六孔培养板（正常组） 中，采用计数法测定细胞培养 0h、6h、12h、24h、36h、48h 的细胞数量。.应用 RT-PCR 检测细胞培养 36h 时两组 OPG 和 RANKL 的 mRNA 表达量。.应用 Western blot 检测细胞培养 36h 时两组 OPG 和 RANKL 的蛋白表达量及其 比值。结果1.骨水泥组于 6h、12h、24h 细胞数量明显低于正常组,具有统计学差异（P0.05），而于 36h、48h 的细胞数量与正常组比较，无统计学差异（p0.05）。2.骨水泥组细胞培养 36h 时 OPG 与 RANKL 在 mRNA 水平的表达量均较正常组 明显增高,有统计学差异(p0.05)。3.骨水泥组细胞培养 36h 时 OPG 与 RANKL 在蛋白水平的表达量均较正常组明显 增高,有统计学差异(p0.05)，然而 OPG/RANKL 比值较正常组明显降低，且具有统计 学差异（p0.05）。结论 1. 按 1:9 混合的 CPPF/CPC 复合材料仍未改变 CPC 早期不利于成骨细胞 的粘附、增殖性能。12. 按 1:9 混合的 CPPF/CPC 复合材料能促进体外人成骨细胞的成骨过程及破骨过程，且破骨过程稍强于成骨过程，。3. 按 1：9 混合的 CPPF/CPC 复合材料具有良好的骨诱导性及骨传导性， 有望成为骨组织修复替代材料用于人体。关 键 字聚磷酸钙纤维磷酸钙骨水泥人成骨细胞OPG/RANKL 系统2Effect of CPPF/CPC on OPG/RANKL of human osteoblasts in vitro AbstractObjective: To preliminary study the effect of CPPF/CPC on OPG/RANKL of cultured human osteoblasts in vitro, and to provide theoretical basis of clinic application of CPPF/CPC.Methods: 1. Mixed the CPPF and CPC according to mass ratio of 1∶9 , and added curing liquid by solid-to-liquid ratio of 3 ∶1 , then poured into a cylindrical mold with diameter of 3cm,and thickness of 3mm .Cultured the human osteoblasts MG63 and modified the cell concentration to 1X105 ,then inoculated the cultured cells with two groups. the first group inoculated with cell culture plate composed of self-made CPPF/CPC called artificial bone group and second group inoculate