bml111对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化保护作用及机制研究word格式论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 摘 要 目的：脂氧素（Lipoxins，LXs）是一类新发现的花生四烯酸代谢产物，具 有强大的抗炎与促炎症消退双重作用，是体内重要的内源性促炎症消退介质， 而且我们的前期研究工作提示 LXs 具备护肝效应。在本研究中我们利用 CCl4 建 立实验性肝纤维化大鼠模型，观察 LXs 受体激动剂 BML-111 对肝纤维化的保护 作用，并探讨其可能作用机制。 方法：Sprague-Dawley（SD）大鼠皮下注射 CCl4 建立大鼠实验性肝纤维化 模型。大鼠肝组织切片 HE 染色观察肝组织损伤和炎症细胞浸润程度。血清 AST （Aspartate transaminase）与 ALT（Alanine transaminase）活性检测反映肝功能 水平。肝脏大体观、肝组织切片 VG 染色和 Masson 染色、生化试剂盒检测肝组 织 Hyp（Hydroxyproline）含量综合评定肝纤维化程度。免疫组化和 Western-blot 法检测肝脏组织α-SAM（α-sooth muscle actin）表达水平。TGF-β1（Transforming growth factor-β1）及 PDGF（Platelet derived growth factor）的表达水平通过 ELISA 和 Western-blot 法 测 定 。 Western-blot 法 检 测 肝 组 织 中 MMP-2 （ Matrix metalloproteinase-2）、MMP-3、MMP-7、MMP-9 及 TIMP-1 （Tissueinhibitors of metalloproteinase-1）的表达水平。肝组织 MDA（Malondialdehyde）含量，SOD （Superoxide dismutase）、GSH-Px（Glutathione peroxidase）、CAT（Catalase）活 性和肝组织总抗氧化能力 T-AOC（Total antioxidant capacity）分别利用生化试剂 盒进行检测。免疫荧光法检测 NF-κB（Nuclear factor κB）P65 的核转位水平。 结果：BML-111 能够抑制大鼠肝脏损伤、炎症细胞浸润和肝功能损害；减 轻大鼠的肝纤维化程度；抑制大鼠 HSC（Hepatic stellate cell）活化；抑制大鼠 肝组织表达 TGF-β1 和 PDGF；降低 MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9 和 TIMP-1 的表达水平；减少 MDA 含量，但增加 SOD、GSH-Px、CAT 抗氧化酶的活性以 及肝组织总抗氧化能力 T-AOC；抑制大鼠 NF-κB P65 核转位。 结论：BML-111 具有保护 CCl4 诱导的大鼠实验性肝纤维化效应。其作用机 制可能包括减少促纤维化细胞因子 TGF-β1 和 PDGF 的表达、抑制 HSC 活化而 减少 ECM 合成、增强大鼠肝组织抗氧化能力、恢复 MMPs/TIMPs 平衡而调节 ECM 的异常代谢、阻碍转录因子 NF-κB P65 核转位。 关键词：脂氧素；肝纤维化；肝星状细胞；炎症 II Abstract ABSTRACT Objective：LXs are a class of newly found arachidonic acid metabolites, possess potent anti-inflammatory and pro-resolution effects. We had previously confirmed the LXs agonists BML-111 had possessed the protection effects for liver. Therefore, this study we investigated the protection effect of BML-111 on hepatic fibrosis and the possible mechanisms. Methods：Sprague-Dawley（SD） rats were used to build experimental hepatic fibrosis via subcutaneous injection of CCl4. The degree of liver injury and inflammatory cell infiltration were observed by HE stain. AST and ALT activity in serum were tested to evaluate the liver function. The level