bms345541对急性粒细胞白血病细胞dna双链断裂修复的影响word格式论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 目录  HYPERLINK \l _bookmark0 英文缩略词表1 中文摘要：2 ABSTRACT 3 前言 4 第一部分 BMS-345541 对 AML 细胞 DNA 损伤修复的影响 8  HYPERLINK \l _bookmark1 第一节 MTT 法检测药物对细胞的增殖抑制作用 8 1 材料9 2 实验方法10 3 结果 11 4 讨论 11 第二节 BMS-345541 对 AML 细胞 DNA 损伤修复的影响 11 1 材料 11  HYPERLINK \l _bookmark2 2 实验方法12 3 结果13 4 讨论16 小结： 17 第二部分 BMS-345541 对 AML 干/祖细胞 DNA 损伤修复的影响18 1 材料18 2 实验方法19 3 结果21 4 讨论 错误!未定义书签。 小结： 23 第三部分 BMS-345541 抑制 AML 细胞 DNA 损伤修复的机制 24 1 材料24 2 实验方法27 3 结果31 4 讨论34 小结： 36 结论 36 参考文献 错误!未定义书签。 综述： 39  PAGE 23 英文缩略词表 英文缩写 英文全称 中文名称 VP-16 Etoposide 依托泊苷 AML Acute Myelogenous Leukemia 急性粒细胞白血病 RT-PCR quantificational real-time polymerase chain reaction 定量反转录聚合酶连锁 反应 DMSO Dimethylsulfoxide 二甲基亚砜 FBS Fetal bovine serum 胎牛血清 HRP Horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶 PVDF poly vinylidene fluoride  HYPERLINK /view/710904.htm 聚偏氟乙烯 SDS sodium dodecyl sulfate 十二烷基硫酸钠 FCM Flow Cytometry 流式细胞仪 FITC fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素 PI Propidium Iodide 碘化丙啶 MTT SDS-PAG E 3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2， 5-diphenyltetrazolium bromide sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis 3-（4，5-二甲基噻唑-2） -2，5-二苯基四氮唑溴盐 十二烷基磺酸钠聚丙烯 酰胺电泳 EDTA Ethylene diaminetetraacetic acid 乙二胺四乙酸 HCA High Content Analysis 高内涵 HR Homologous recombination 同源重组 摘要 BMS-345541 对 AML 细胞 DNA 双链断裂修复的影响 目的：体外研究BMS-345541对急性粒细胞白血病（AML）细胞DNA损伤修复 的影响及其可能的作用机制。 方法：（1）四甲基偶氮唑蓝(MTT)法体外检测VP-16作用于AML细胞后，加 入 或 不 加 入 BMS-345541 对该细 胞 增 殖 抑 制 的 影 响 ； （ 2 ） 流 式 细 胞 术 检 测 BMS-345541对AML细胞DNA损伤修复的影响；（3）通过FITC/PI双染法检测两药 联合作用对细胞的凋亡的影响；（4）通过PI染色法测定细胞周期；（5）高内涵观 察不同处理组γ-H2AX、p-ATM、RAD51募集在断裂位点的焦点情况；（6）实时 荧光定量PCR检测ATM转录水平的变化；（7）应用蛋白免疫印迹法检测DNA损伤 相关蛋白的表达。 结果：（1）BMS-345541可增强VP-16对AML 细胞的增殖抑制作用；（2）流 式检测结果表明BMS-345541使得AML细胞及其干、祖细胞DNA断裂位点γ-H2AX 增加；（3）加入BMS-345541组能够抑制VP-16导致的AML细胞G2/M期阻滞；（4） 联合用药组细胞的凋亡率比单药组高；（5）高内涵检测断裂位点的γ-H2AX、p-ATM 及RAD51的荧光焦点，6 h后，加入BMS-345541组比修复组的焦点的平均荧光强度 和平均荧光面积高；（6）实时荧光定量PCR检测联合用药组比修复组ATM转录水 平高；（7）联合用药组比修复组的DNA损伤相关蛋白的表达高。 结论：VP-16导致AML细胞产生DNA损伤，而BMS-345541能通过抑制HR通路 来抑制细胞DNA损伤修复。 关键