aβ1 40和192 igg saporin致阿尔茨海默病动物模型的构建word格式论文.docxVIP

种动物模型都能在一定程度上模拟AD的行为学的损害及部分病理特征，但是仍然没有一种动物模型能够较全面的模拟AD的所有病理特征，严重阻碍了AD研究的进展。本实验主要研究神经免疫毒素192-IgG-saporin及Aβ(1-40)片段致阿尔茨海默病的实验动物模型的构建。实验部分1 材料与方法SD雄性大鼠32 只，重250-300g，随机分成4 组，每组8 只，分别为：正常组、Aβ(1-40)组（Aβ组）、神经免疫毒素192-IgG-saporin组（192组）、神经免疫毒素192-IgG-saporin及Aβ1-40联合组（联合组）。Aβ组单侧海马内注射Aβ(1-40)片段10μl（1μg/μl），192-IgG-saporin组单侧侧脑室注射192-IgG-saporin5μl（2.5μg/μl）。联合组为单侧脑室以及海马内分别注射192-IgG-saporin5μl（2.5μg/μl）和Aβ1-4010μ（l1μg/μl），坐标分别为，侧脑室：前囟后0.8mm，左侧旁开1.5mm，进针深5.5mm。海马：前囟后3.4mm，左侧旁开2.5mm,进针深4.5mm。2 周后行Y迷宫以测试，测试结束后经灌注，固定，去脑，蔗糖脱水，冰冻切片。基底前脑切片行ChAT免疫组化染色，对内侧隔核（MS）,斜角带垂直支（VDB）的ChAT阳性神经元进行计数，海马切片行胆碱能纤维（AChE）、星型胶质细胞（GFAP）免疫组化染色、尼氏染色、刚果红染色及硫磺素T荧光染色，对海马AChE阳性纤维、锥体细胞和GFAP阳性细胞计数。数据用SPSS统计软件包进行统计学处理。2 结果Y迷宫测试大鼠学习记忆能力，结果显示各损伤组学习记忆能力与正常组比较均有下降，差异有统计学意义（P0.05）。各损伤组之间无明显变化，差异无统计学意义（P0.05）。刚果红以及硫磺素T染色结果表明，Aβ(1-40)组及联合组海马区内有聚集的Aβ沉积.且能造成海马区明显的锥体细胞丢失,差异有统计学意义（P0.05），192-IgG-saporin组海马区锥体细胞无明显变化（P0.05）。Aβ1-40组及联合组海马区星型胶质细胞增生（P0.05），192-IgG-saporin组未见明显增生（P0.05）. 192-IgG-saporin组以及联合组胆碱能纤维数量明显减少（P0.01），Aβ1-40组胆碱能纤维数量未见明显变化（P0.05）。192-IgG-saporin组及联合组基底前脑ChAT阳性细胞数明显减少（P=0.01），Aβ组基底前脑ChAT阳性细胞数未见明显变化（P0.05）.3 小结Aβ以及神经免疫毒素联合作用动物模型，学习记忆能力明显下降.基底前脑胆碱能神经元数量显著减少。海马区椎体细胞数目减少，星形胶质细胞增生，胆碱能神经纤维数量明显减少。总之：Aβ(1-40)和神经免疫毒素的联合作用比单独作用能更加全面的模拟AD病理特征，是比较理想的AD动物模型。关键词：阿尔茨海默病，动物模型，Aβ1-40片段，192-IgG-SaporinChAT阳性神经元，胆碱能纤维，星形胶质细胞，锥体细胞，学习记忆.AnimalmodelofAlzheimer’sdiseaseinducedby Aβ(1-40)combinedwith192-IgG-saporinMaster:Xiao-SongHeSupervisor:ProfessorLongDahongUnit:HumananatomydepartmentofGuangzhoumedicalcollegeABSTRACTAlzheimersdisease(Alzheimersdisease,AD)isthemostcommonneurodegenerativedisease,mainlyintheelderlyaged65andabove.Theclinicalcharacteristicsofinsidiousonset,gradualemergenceofmemorylossandcognitivedysfunction、abnormalbehaviorandsocialbarriers.AsChinasgrowingagingpopulation,Alzheimersdiseaseisincreasinglybecomingaserioussocialproblem. Accordingtosurveys,Chinahas129millionpopulationofmorethan60years,theelderlyproportionofthetotalpopulationhasreached10.15percent,makingChinas advanceintooldage-basedcountrywithapopu