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第一章 绪论 优秀毕业论文  PAGE 14 精品参考文献资料 第1章 绪论 急性早幼粒细胞白血病（APL,Acute Promyelocytic Leukemia）是白血病的 一个特殊类型，占白血病发病的 10%-15%，95%以上的 APL 患者体内染色体发生突 变，都有 t(15,17)的易位，形成了新的 PML/RARα融合基因，编码 PML/RARα融 合蛋白，所以检测患者体内的 PML/RARα融合蛋白的有无和含量的多少，可以用 来进行白血病的诊断分型和病情分析。传统的实验室诊断 APL 的方法是建立在形 态学上的分类法，但有很大的局限性，不利于临床上的诊断。随着免疫学和流式 阵列技术的发展，白血病的免疫分型已成为诊断白血病的重要标准之一。之前使 用荧光显微镜的方法基本被淘汰，现在国际上公认的通用的方法是流式细胞术 （FCM）。流式细胞术白血病免疫分型是利用荧光素标记的单克隆抗体作为分子探 针，使用多个参数分析所检测的白血病细胞的细胞膜、浆或细胞核的免疫表型， 由此诊断所检测的白血病细胞所属的细胞系列及其分化程度。 流式细胞术是对于处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行多参数的 快速地定量分析和分选的技术。经过荧光标记的细胞单个通过流动室，通过激光 的照射激发荧光，再通过流式细胞仪的光电倍增管、收集器等，将光信号转化为 电信号，可以用来进行定量和定性分析。流式细胞术可以用来检测细胞膜内和细 胞膜外的蛋白表达、膜内 DNA 含量、细胞周期、细胞凋亡以及酶活性等，也可用 探针来捕获抗体。 1.1 白血病病理特征和分类 白血病是骨髓、脾、肝等造血器官中白血病细胞的恶性增生，可进入血 循环、并浸润到全身各组织脏器中，临床症状表现为贫血、不明原因的出血、 发热以及肝、脾、淋巴结肿大等。病理学特征为白血病细胞在骨髓及其他造 血组织中呈现恶性的不受控制地增生，浸润全身各组织和脏器，产生不同症 状。外周血血细胞有形状和性质方面的变化。每天骨髓能产生上百亿个新的 血细胞，大多数为红细胞，但是患有白血病的人体内产出的白细胞比实际需 要的多，且所产生的白细胞大多是不成熟的，其存活期比正常情况下长[11]。 所以白血病患者体内虽然白细胞数量很多，但不能像正常白细胞一样发挥抗 感染作用，反而会对机体产生不同程度的影响，可以影响人体重要器官的功 能，影响正常血细胞的数量。随着肿瘤细胞的大量增生，可以抑制正常红细 胞和血小板的止血功能，机体也没有足够的白细胞发挥抗感染作用，所以很 容易出现贫血、不明原因的出血、发热以及肝、脾、淋巴结肿大等。 白血病在病理学上的另一个重要表现是增生细胞的组织浸润。增生细胞 的组织浸润主要发生在骨髓及其他造血组织中，也可出现在全身其它组织中， 致使正常的细胞显著减少。。其它最常发生白血病浸润的脏器是肾、肺、心脏 及胸腺等。根据增生细胞类型，可分为粒细胞性、淋巴细胞性和单核细胞性 三类，按白血病细胞的分化程度可分为急性和慢性两类。 1.2 急性早幼粒细胞白血病 急性早幼粒细胞白血病是血液系统最常见的恶性肿瘤之一，主要病变为骨髓 中的早幼粒细胞失去进一步分化成熟的能力而停滞在早幼粒阶段。患者有特异性 的染色体易位，该易位使 15 号染色体上的早幼粒细胞白血病（PML）基因与 17 号染色体上的维甲酸受体 α（RARα）基因发生融合，形成 PML-RARα 融合基因并 编码 PML-RARα 融合蛋白。融合蛋白抑制正常髓系细胞分化，阻止正常的早幼粒 细胞成熟，使得骨髓中异常早幼粒细胞增多。这是由于 PML-RARα 融合蛋白与抑 制因子/组蛋白-去乙酰基酶形成复合物，协同作用抑制髓系细胞分化基因的转录而 引起的。PML-RARα 还能干扰 PML 的抑制肿瘤和前凋亡的功能，造成白血病细胞 增生及寿命的延长。 1.3 急性早幼粒细胞白血病的分子生物学诊断方法 根据急性早幼粒细胞白血病的病理特点，诊断急性早幼粒细胞白血病，可以 通过检测染色体 t(15,17)的易位，也可以通过检测 PML-RARα 融合蛋白的表达来实 现[27]。 1.3.1 染色体 t(15;17)的检测 从 20 世纪 70 年代起，目前广泛采用国外科学家提出的以形态学为基础的分 类法，但也有很大的局限性，后来又提出了基于检测易位染色体 t(15;17)存在的 MIC 分型诊断，临床实验证明 MIC 分型诊断中的染色体 t(15;17)的检测以其对 APL 高度的特异性具有非常重要的作用[10]，对 APL 的鉴别诊断与分化程度检测具有重 要意义，可作为 APL 诊断的金指标。 染色体 t(15;17)的易位发现于 APL 中，分子生物学研究揭示原位于 17q 上的维 甲酸受体 α（RARα）基因易位到 15q 上和位于该处的早幼粒细胞