apoai对lps诱导的内毒素血症小鼠的治疗作用的研究word格式论文.docxVIP

目录英文缩略语索引 1中文摘要2英文摘要4前言61 实验材料 81.1 主要试剂81.2 实验动物81.3 仪器设备91.4 实验主要溶液的配制102 实验方法 122.1 实验动物分组及模型制备122.2 标本采集122.3 血浆中 TNF-α、IL-6 和 IL-8 浓度的测定 132.4 小鼠肝脏及肺组织病理学检查132.5 逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测 CD14 基因的表达 142.6 免疫印迹分析162.7 统计处理183 实验结果 193.1 血浆中 TNF-α、IL-6 和 IL-8 浓度的测定193.2 小鼠肝及肺组织病理学检查203.3 ApoA-I 对 LPS 诱导的 CD14 mRNA 表达的影响253.4 ApoA-I 对 LPS 诱导的 CD14 蛋白表达的影响284 讨论315 结论34参考文献35综 述39 攻读硕士学位期间论文发表 48致谢49英文缩略语索引缩略语英文全称中文译名ApoA-IApolipoprotein AI载脂蛋白AICD14Cluster of differentiation antigen 14白细胞分化抗原-14DEPCDiethylpyrocarbonate焦炭酸二乙醋EBEthidium bromide溴化乙锭ECLEnhanced chemiluminescence化学发光剂GPIGlycosyl phosphatidyl inositol糖基磷脂酰肌醇HRPHorseradish peroxidase辣根过氧化物酶HEHematoxylin and eosin苏木精和伊红HDLHigh density lipoprotein高密度脂蛋白IL-6Interleukin-6白细胞介素-6IL-8Interleukin-8白细胞介素-8LPSLipopolysaccharide脂多糖LBPLipopolysaccharide binding protein脂多糖结合蛋白mRNAMessenger RNA信使RNANONitrogen monoxidum一氧化氮Oligo(dT)Oligo deoxythymidine寡聚胸腺嘧啶核甘酸RNARibonucleic acid核糖核甘酸RT-PCRReverse transcription-polymerase chainreaction逆转录聚合酶链式反应rpmRotation per minute每分钟转数TNF-αTumor necrosis factor肿瘤坏死因子ApoA-I 对 LPS 诱导的内毒素血症小鼠的治疗作用的研究研究生：胡 莉导师：乔新惠 教授中 文 摘 要背景：内毒素又称脂多糖（lipopolysaccharide，LPS），是革兰阴性细菌外膜的主 要成分。内毒素血症及与其有关的急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征和多器官 功能障碍综合征是病人感染死亡的重要原因。载脂蛋白 AI（Apolipoprotein AI， ApoA-I）是高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL）的主要载脂蛋白，能 够直接或间接结合 LPS，中和 LPS 的毒性。 目的：本项目拟通过建立内毒素血症小鼠模型，探讨 ApoA-I 对 LPS 诱导的内毒 素血症的治疗作用及可能机制。方 法：以小鼠内毒素血症模型为研究对象，小鼠被随机分为生理盐水组、ApoA-I 低剂量组（10mg/kg）、ApoA-I 高剂量组（50mg/kg）、LPS 组（LPS＋D-半乳糖）、 D-半乳糖组（生理盐水＋D-半乳糖）。建立小鼠内毒素血症模型；以放射免疫分 析药盒测定血浆中细胞因子 TNF-α、IL-6 和 IL-8 的浓度；取小鼠肝组织和肺组 织做病理切片，观察组织病理变化；RT-PCR 法检测小鼠不同组织中 LPS 受体 CD14 的 mRNA 的表达；Western blotting（WB）法检测小鼠不同组织中 LPS 受 体 CD14 的蛋白表达。实验结果：与 LPS 组相比，ApoA-I 能够降低血浆 TNF-α（P0.05）、IL-6（P0.01） 和 IL-8（P0.01）的水平。 且 ApoA-I 的高剂量组较低剂量组 TNF-α（P0.05）， IL-6（P0.01）和 IL-8（P0.01）下降更明显。组织病理分析表明，ApoA-I 可 以显著减轻内毒素血症小鼠肺组织和肝组织的损伤程度。RT-PCR 结果显示： ApoA-I 治疗后，LPS 诱导的 CD14 mRNA 的表达增量显著降低（P0.01），且 ApoA-I 的高剂量组小鼠心、肺、肝、肾组织中的 CD14mRNA 的表达降低较低 剂量组更明显（P0.05）。WB 结果显示：ApoA-I 治疗后，LPS 诱导的 CD14 蛋 白的