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apelin 13对3t3 l1脂肪细胞aqp7表达的影响word格式论文
学位论文原创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的工作研究及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在论文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。作者签名:日期:年月日学位论文使用授权声明本人授权汕头大学保存本学位论文的电子和纸质文档,允许论文被查阅和借阅;学校可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存和汇编论文;学校可以向国家有关部门或机构送交论文并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容。对于必威体育官网网址的论文,按照必威体育官网网址的有关规定和程序处理。作者签名:导师签名:日期:年月日日期:年月日中文摘要背景随着社会的发展和人们生活方式的改变,目前肥胖症(obesity)在世界范围内已形成流行趋势。肥胖与冠心病、高血压、2型糖尿病及血脂紊乱等许多代谢性疾病关系密切。现有的减肥途径包括饮食控制、运动锻炼、减肥药物等,但现实是,患者往往难以坚持严格的饮食控制和规律的运动,副作用多、疗效不持久等限制了减肥药的长期应用。因此,探索一条具有远期疗效和安全性的减肥途径具有重要的现实意义。肥胖产生的关键在于能量摄入大于消耗,剩余的能量以甘油三酯(Triglyceride,TG)蓄积的形式贮存体内,最后导致脂肪细胞肥大和数量增多。因此,减少脂肪细胞内TG蓄积是治疗肥胖的关键所在。研究发现,脂肪细胞内TG分解成游离脂肪酸(Free fattyacid,FFA)与甘油,甘油通过水通道蛋白-7(Aquaporin 7,AQP7)向胞外排泄,从而减少胞内TG的合成,这为肥胖症的防治提供了新的研究方向。我们试图从细胞脂肪因子调控的角度寻找影响脂肪细胞AQP7基因表达的上游信号调控因子。而Apelin作为一种脂肪因子(adipocykine)与能量代谢之间存在密切关系。在肥胖和胰岛素抵抗小鼠中,Apelin能增加骨骼肌对葡萄糖的摄取利用、提高胰岛素敏感性、降低血浆胰岛素、甘油三酯及游离脂肪酸浓度、减小脂肪细胞体积、减轻小鼠体重。上述研究提示:Apelin可能在肥胖症的发生、发展中发挥作用。脂肪细胞内TG分解成FFA与甘油后,若不能及时被排至胞外代谢,将导致脂肪细胞内TG重新合成,产生肥胖。而Apelin已证实能减小脂肪细胞内TG的含量,鉴于AQP7有助于脂肪细胞内甘油向外排泄,减少TG合成,因此我们提出以下假说,Apelin能促进脂肪细胞AQP7高表达,从而减少脂肪细胞内TG的蓄积,最终达到减肥效果。本课题以成熟3T3-L1脂肪细胞为研究对象,用油红O染色鉴定,在不同浓度和时间的Apelin-13 作用下从转录水平检测3T3-L1 脂肪细胞AQP7表达水平,从而探讨Apelin-13 与AQP7表达之间的关系,为后续相关减肥机制奠定基础。目的探讨脂肪因子Apelin-13 对3T3-L1 脂肪细胞AQP7基因表达的剂量和时间关系。方法以体外培养3T3-L1 脂肪细胞为研究对象,油红O染色鉴定,分别以不同浓度(0、10-9、10-8、10-7、10-6M)Apelin-13组和10-5M罗格列酮阳性对照组干预24h、10-7MApelin-13 干预不同时间(0、12、24、36、48h)后,提取细胞的总RNA,用RT-PCR法检测AQP7 mRNA 表达水平。结果3T3-L1脂肪细胞胞内脂滴油红O染色均呈红色。在浓度组中,阳性对照组与阴性对照组之间存在显著差异(P0.05);与阴性对照组比较,10-8、10-7MApelin-13能显著刺激AQP7mRNA表达(P0.05);10-8、10-7MApelin-13组与阳性对照组比较,10-7MApelin-13 能显著刺激AQP7mRNA表达(P0.05);10-8、10-7MApelin-13两组之间无统计学差异。在时间组中,10-7MApelin-13的12、24、36h组AQP7mRNA表达较0h组能显著刺激AQP7 mRNA 表达(P0.05),作用24h 表达最高;但12、24、36h 三组AQP7mRNA表达之间无统计学差异。结论Apelin-13在一定程度上能增加3T3-L1 脂肪细胞AQP7 mRNA 表达的水平,并分别以10-7M和24h为最佳作用浓度和时间。关键词:Apelin;3T3-L1 脂肪细胞;AQP7;肥胖ABSTRACTBackgroundAlong withsocialdevelopmentandlifestylechanges,obesity hasbecomeatrendgloballyat present.obesityisintimatelyassociatedwithmanymetabolicdis
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