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2018-05-18 发布于上海
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apelin促人脐静脉内皮细胞与单核细胞粘附及其pi3k1433信号途径研究word格式论文.docx

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apelin促人脐静脉内皮细胞与单核细胞粘附及其pi3k1433信号途径研究word格式论文

主要英文缩略语索引ApelinAPJ endogenous ligandAPJ 内源性配体APJputative receptor protein related to the angiotensin receptor AT1血管紧张素受体样受体或血管紧张素受体 AT1 相关的受体蛋白AngIIBSAAngiotensin IIbovine serum albumin血管紧张素 II牛血清白蛋白DMEMDMSODulbecco’s modified Eagle’s mediumdimethyl sulfoxideDulbecco 极限必需培养基二甲基亚砜FBSfetal bovine serum胎牛血清GPCRHUVECG protein-coupled receptorhuman umbilical vein endothelial cellsG 蛋白偶联受体人脐静脉内皮细胞MPOMyeloperoxidase髓过氧化物酶MChuman monocytic cell line THP-1人单核细胞株 THP-1oGPCRPAGEorphan G protein-coupled receptorpolyacrylamide gel electrophroesis孤儿 G 蛋白偶联受体聚丙烯酰胺凝胶电泳PMSFphenylmethylsulfonyl fluoride苯甲基磺酰氟PI3Kp- PI3K RAS SDSPhosphoinositide 3-Kinasephosphorylated phosphatidyl-inositol-3 kinase renin-angiotensin systemsodium dodecyl sulfate磷脂酰肌醇(-3)激酶磷酸化磷脂酰肌醇(-3)激酶肾素-血管紧张素系统十二烷基硫酸钠WBWestern Blotting蛋白质印迹Apelin促人脐静脉内皮细胞与单核细胞粘附及其PI3K/14-3-3信号途径研究研究生：张先慧指导教师：陈临溪教授摘要目的: 研究 apelin-13 对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）与单核细胞（MCs）粘附的作用及其 PI3K/14-3-3 信号转导机制，探讨 apelin-APJ 系统新的生理功能及其信号转导机制。方法: 培养 HUVECs 和 MCs；MPO 法检测 apelin-13 对 HUVECs 与 MCs 粘附的影响； Western Blotting 检测 apelin-13 对 HUVECs VCAM-1、p-PI3K 、PI3K 和 14-3-3 表达。结果: Apelin-13（0、0.5、1、2、4μmol/L）浓度依赖性促进 HUVECs 与 MCs 粘附，在 1μmol/L 时粘附达到峰值，1μmol/L apelin-13（0，3，6，12，24，48h）时间依赖性促进 HUVECs 与 MCs 粘附，在刺激 12h 时粘附达到峰值；apelin-13（0、0.5、1、2、4μmol/L）浓度依赖性促进 HUVECs 粘附分子 VCAM-1 表达，在 1μmol/L 时作用达到峰值，1μmol/L apelin-13（0，3，6，12，24，48h）时间依赖性促进 HUVECs 粘附分子 VCAM-1 表达，在刺激 12h 时作用达到峰值。PI3K 的特异性抑制剂 LY294002 和 14-3-3 抑制剂 Difopein 明显抑制 apelin-13 诱导 HUVECs 与 MCs 粘附，一氧化氮合酶抑制剂 LNNA 促进了 apelin-13 诱导 HUVECs 与 MCs 粘附。Apelin-13（0、0.5、1、2、4μmol/L）浓度依赖性诱导 HUVECs PI3K 磷酸化及 14-3-3 表达，于 1μmol/L 时作用达到峰值，1μmol/L apelin-13 时间依赖性诱导 HUVECs PI3K 磷酸化及 14-3-3 表达，分别于刺激 30min，5min 时作用达到峰值；PI3K 的特异性抑制剂 LY294002 和 14-3-3 抑制剂 Difopein 明显抑制 apelin-13 诱导 HUVECs PI3K 磷酸化及 14-3-3 和 VCAM-1 表达；apelin-13、LY294002 和 Difopein 对 HUVECs PI3K 的表达无影响。结论: Apelin-13 通过 PI3K/14-3-3 信号转导途径促进 HUVECs 与 MCs 粘附。关键词: Apelin-13；APJ；细胞粘附； PI3K；14-3-3Apelin promote monocytes adhesion to HUVECs via 14-3-3 in PI3K sig