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第19章__核酸和蛋白质的生物合成
转录起始过程: 辨认起始位点: ?亚基辨认启动子的-35区,RNA聚合酶全酶(?2????)与模板疏松结合。酶滑行到-10区,通过??亚基与模板牢固结合。 2. DNA双链解开: RNA聚合酶挤入DNA双链中,解链长度约20个核 苷酸, 拓扑异构酶参与。 3. 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应,形成转录起始复合物。 RNApol (?2????) - DNA - 5pppGpN- OH 3? 转录起始复合物: RNA聚合酶-DNA模板-四磷酸二核苷酸 5?-pppG -OH + NTP ? 5?-pppGpN - OH 3? + ppi 转录延长 1. ?亚基脱落,RNA–pol聚合酶核心酶变构,与模板结合松弛,沿着DNA模板前移; 2. 在核心酶作用下,NTP不断聚合,RNA链不断延长。 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi 3. 转录空泡的形成: DNA解开的两条单链与RNA聚合酶及其转录产物RNA构成的转录复合物。 3′ 3′ RNA-DNA杂交螺旋 聚合酶的移动方向 新生RNA 复链 解链 有义链 模板链(反义链) 延长部位 模板链(template strand) 反义链 DNA双链中,能按碱基配对规律指引转录,生成RNA的一股单链。 编码链(coding strand)有义链 DNA双链中碱基序列与RNA一致的一股链。 反义核酸:以编码链为模板合成的核酸,称为反义核酸(反义RNA、反义DNA)。 序列与模板链一致,能抑制mRNA表达。 ( 四 ) 突变的分子改变类型 错配 (mismatch) 缺失 (deletion) 插入 (insertion) 重排 (rearrangement) 框移 (frame-shift) 错配(mismatch) DNA分子上的碱基错配称点突变(point mutation)。点突变发生在基因的编码区域,可导致氨基酸的改变。 1. 转换:发生在同型碱基之间,即嘌呤代替另一嘌呤,或嘧啶代替另一嘧啶。 2. 颠换:发生在异型碱基之间,即嘌呤变嘧啶或嘧啶变嘌呤。 缺失、插入和框移突变 缺失:一个碱基或一段核苷酸链从DNA大分子上消失。 插入:原来没有的一个碱基或一段核苷酸链插入到DNA大分子中间。 框移突变:三联体密码的阅读方式改变,造成蛋白质氨基酸排列顺序发生改变,其后果是翻译出的蛋白质可能完全不同。 谷 酪 蛋 丝 5’ ……G C A G U A C A U G U C …… 丙 缬 组 缬 正常 5’ ……G A G U A C A U G U C …… 缺失C 缺失引起框移突变 重排(rearrangement DNA分子内发生较大片段的交换,称为重组或重排。 移位的DNA可以在新位点上颠倒方向反置(倒位),也可以在染色体之间发生交换重组。 (五 )DNA损伤的修复(DNA repairing 修复是指针对已发生了的缺陷而施行的补救机制。 修复的主要类型: 光修复(light repairing) 切除修复(excision repairing) 重组修复(recombination repairing) SOS修复 光修复 光修复过程是通过光修复酶(photolyase)催化而完成的,仅需300~600nm波长照射即可活化,普遍存在于各种生物,人体细胞中也有发现。 通过此酶作用,可使嘧啶二聚体分解为原来的非聚合状态,DNA完全恢复正常 光修复酶(photolyase) UV 切除修复(excision repairing) 细胞内最重要的修复机制,包括去除损伤DNA,填补空隙和连接。 1、原核生物DNA损伤修复: UvrA,UvrB辨认及结合DNA损伤部位; UvrC在解螺旋酶的协助下切除损伤部位。 DNA-polⅠ和连接酶填补空隙和连接。 2、真核生物DNA损伤修复: XP类蛋白辨认和切除损伤DNA部位,切除后留下的空隙,则由DNA-pol δ及ε加以修复。 E.coli的切除修复方式 UvrA UvrB UvrC OH P DNA聚合酶Ⅰ OH P DNA连接酶 ATP 重组修复(recombination repairing) 当DNA分子的损伤面较大,还来不及修复完善就进行复制时,损伤部位因无模板指引,复制出来的新子链会出现缺口,这时,就靠重组蛋白RecA的核酸酶活性将另一股健康的母链与缺口部分进行交换,以填补缺口。 损伤链移到己完成复制的链上,如果损伤又只发生
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