tct联合hpv e6e7 mrna定量检测宫颈上皮内瘤变的临床应用价值.docVIP

TCT联合HPV E6E7 mRNA定量检测宫颈上皮内瘤变的临床应用价值 　　【摘要】 目的：探讨利用HPV E6/E7 mRNA检测技术检测妇科子宫颈上皮内瘤变的临床应用价值。方法：对69例TCT检查结果为宫颈上皮内瘤变的患者，应用HPV E6/E7 mRNA检测技术对感染HPV病毒中的癌基因片段E6、E7转录子做出定量检测。结果：ASC-H组E6/E7 mRNA转录阳性率、转录数分别为60.6%、（18 285.42±1487.71），均高于≤ASC-H组的33.3%、（2668.43±681.39），差异均有统计学意义（P 　　【关键词】 TCT； HPV E6/E7 mRNA定量检测； 宫颈上皮内瘤变 　　【Abstract】 Objective：To discuss the clinical application value of quantitative detection the HPV E6/E7 mRNA in cervical intraepithelial neoplasia.Method：In 69 cases of TCT examination results for cervical intraepithelial neoplasia，use of HPV E6/E7 mRNA detection technology for the infection of HPV virus in the cancer gene fragment E6，E7 transcription to make quantitative detection.Result：ASC-H group HPV E6/ E7 mRNA transcription positive rate （60.6%） was higher than the≤ASC-H group （33.3%），ASC-H group HPV E6/E7 mRNA transcription number （18 285.42±1487.71） was higher than the ≤ASC-H group （2668.43±681.39），the differences were statistically significant（P 　　1.2 主要仪器与试剂 QuantiVirusTM诊断试剂盒原材料、QuantiVirusTM冷光仪均由美国Diaca-rtaLLC公司总部提供。 　　1.3 方法 　　1.3.1 标本采集及处理 采用专用宫颈细胞刷收集子宫颈和宫颈鳞柱交界处的脱落细胞，将颈管细胞采集刷伸入阴道并抵住宫颈，其前面的刷毛伸入到宫颈管内，按顺/逆时针方向转动宫颈刷5圈，并立即将其收集到的细胞保存在专用保存液的瓶子中。 　　1.3.2 分组 本研究按照宫颈细胞学TBS分类法，将宫颈上皮内瘤变分为两组：第一组为ASC-H组：包括鳞状细胞癌（SCC）、腺癌（AC）、高度鳞状细胞上皮内病变（HSIL）、低度鳞状细胞上皮内病变（LSIL）；第二组为≤ASC-H组：包括意义不明不典型鳞状细胞（ASC-US）、不能除外高度不典型鳞状上皮细胞（ASC-H）。 　　1.3.3 HPV E6/E7 mRNA定量检测 HPV E6/E7 mRNA定量检测使用专利的bDNA技术，利用专利的探针设计捕获待测目标，再经过杂交信号放大即可定量检测病毒，最终通过添加底物产生化学发光，以此对待测核酸即HPV病毒中的癌基因片段E6、E7转录子做出定量检测，通过转录数值来判断HPV病毒与上皮细胞整合的情况，从而判断宫颈癌及癌前病变发生的可能性。转录数大于1000为HPV E6/E7 mRNA定量检测阳性，转录数1000～4000为低度危险值；4000～10000为中度危险值；10000为高度危险值。 　　1.4 统计学处理 采用SPSS 20.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验；计数资料以率（%）表示，比较采用 字2检验，PASC-H组中HPV E6/E7 mRNA转录阳性者20例，转录阳性率为60.6%，两组比较差异有统计学意义（PASC-H组E6/E7 mRNA转录数为（18 285.42±1487.71），高于≤ASC-H组的（2668.43±681.39），差异有统计学意义（PASC-H组E6/E7 mRNA转录阳性率、转录数分别为60.6%、（18 285.42±1487.71），均高于≤ASC-H组的33.3%、（2668.43±681.39），差异均有统计学意义（P 　　总之，这种以专利的bDNA技术为基础的HPV E6/E7 mRNA的定量检测通过对HPV E6/E7转录值的升降来判断宫颈癌及癌前病变发