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Th17细胞相关细胞因子和抗CCP抗体检测在类风湿性关节炎中的临床应用性研究 　　[摘要]目的 探讨Th17相关细胞因子和抗CCP抗体在类风湿性关节炎（RA）中的相关性和临床意义。方法 回顾分析2015年1月～2016年5月在我院治疗的60例RA患者，根据DAS28积分分为活动组（DAS283.2）32例和稳定组（DAS28≤3.2）28例，另选择60例健康者作为对照组，用ELISA法测定血清Th17相关细胞因子（IL-17、IL-6、TGF-β1），用胶体金免疫层析法检测抗CCP抗体阳性率，比较三组测定结果。结果 抗CCP抗体阳性率：活动组稳定组对照组（P稳定组对照组（P 　　[关键词]Th17相关细胞因子；抗CCP抗体；类风湿性关节炎；临床意义 　　[中图分类号] R593.22 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2017）04（c）-0153-03 　　[Abstract]Objective To investigate the correlation and clinical significance of Th17-related cytokines and anti-CCP antibodies in rheumatoid arthritis.Methods 60 patients with rheumatoid arthritis（RA） who were treated in our hospital from January 2015 to May 2016 were retrospectively analyzed.According to DAS28 scores，the patients were divided in to active group of 32 patients（DAS283.2） and stable group of 28 patients （DAS28≤3.2）.Another 60 healthy subjects were selected as the control group.Serum Th17-related cytokines （IL-17，IL-6，TGF-β1） were determined by ELISA，and the positive rate of anti-CCP antibody was detected by colloidal gold immunochromatography.The testing results were compared between the three groups.Results The positive rate of anti-CCP：active groupstable groupcontrol group（Pstable groupcontrol group（P3.2）32例和稳定组（DAS28≤3.2）28例。其中活动组年龄（51.2±8.4）岁，男性10例，女性22例；稳定组年龄（50.5±9.2）岁，男性14例，女性18例；对照组年龄（51.4±8.8）岁，男性29例，女性31例。三组患者年龄、性别比较，差异无统计学意义（P0.05），具有可比性。本研究经我院医学伦理委员会批准。 　　1.2方法 　　所有患者均在清晨空腹状态下采静脉血10 ml，经4000 r/min离心10 min，取上层血清置于-80℃冷藏保存待用，全过程用时≤30 min。Th17相关细胞因子（IL-17、IL-6、TGF-β1）通过酶联免疫吸附法（ELISA）使用相关试剂盒（上海研生实业有限公司，96T/48T）测定。①设标准孔8孔，每孔加入相应浓度25 μl标准品，余孔加入25 μl血清样品于相应孔中；②每孔加入25 μl酶联物，轻轻混匀30 s，室温温育30 min；③洗板：甩尽板内液体，用洗涤液洗涤反应板（每孔加入35 μl洗涤液），并去除水滴，反复洗涤3次；④每孔加入50 μl酶复合物，轻轻混匀30 s，室温温育30 min；⑤洗板：甩尽板内液体，用洗涤液洗涤反应板（每孔加入35 μl洗涤液），并去除水滴，反复洗涤3次；⑥每孔加入50 μl显色液，?p轻混匀10 s，室温温育15 min；⑦每孔加入50 μl终止液，轻轻混匀30 s，30 min内在450 nm处读取OD值；⑧以OD值为纵坐标，以标准品浓度为横坐标，绘制标准曲线。根据血清样品的OD值在标准曲线上查出其浓度。抗CCP抗体通过胶体金免疫层析法使用相关试剂盒（上海荣盛生物药业有限公司，沪食药监械准字2014第2400660号）检测，滴入3～4滴血清，待10 min读结果。记录抗CCP抗体阳性率。 　　1.3观察指标