转化生长因子、增殖细胞核抗原和bcl-2在皮肤混合瘤中的表达及意义.docVIP

精品论文 参考文献 转化生长因子、增殖细胞核抗原和bcl-2在皮肤混合瘤中的表达及意义 阎凯 (四川省医学科学院/四川省人民医院皮肤病性病研究所 四川成都 610031) 【摘要】目的 检测转化生长因子(TGF)- 、增殖细胞核抗原(PCNA) 和bcl-2在皮肤混合瘤中的表达及意义。方法 采用免疫组化法检测18例皮肤混合瘤的石蜡包埋组织及10例正常皮肤组织中TGF- 、PCNA和bcl-2的表达。结果 TGF- 在皮肤混合瘤组织中阳性率高于正常皮肤对照组，两者差异有统计学意义（Plt;0.05）；PCNA在皮肤混合瘤组织中阳性率高于正常皮肤对照组，两者差异有统计学意义（Plt;0.05）；bcl-2在皮肤混合瘤组织中阳性率高于正常皮肤对照组，两者差异有统计学意义（Plt;0.05）。结论 TGF- 、PCNA和bcl-2在皮肤混合瘤组织中均呈高表达，其与皮肤混合瘤的发生关系密切。 【关键词】转化生长因子 增殖细胞核抗原 bcl-2 皮肤混???瘤 【中图分类号】R730 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）33-0087-02 皮肤混合瘤（mixed tumor of the skin, MTS）是一种少见的良性皮肤附属器肿瘤，关于此病的研究较少，其发生机制尚不清楚。本研究采用了免疫组化法，检测转化生长因子(TGF)- 、增殖细胞核抗原(PCNA) 和bcl-2在皮肤混合瘤中的表达，探讨它们在皮肤混合瘤的发生、发展中的意义和价值。 1 资料与方法 1.1 研究对象：18例标本均来自四川省人民医院皮肤病性病研究所病理科1990年至2010年存档的石蜡包埋组织块，另设10例在我院行CO2激光包皮环切术的正常包皮组织为对照组。 1.2 试剂：TGF-alpha;、PCNA和bcl-2单克隆抗体均为丹麦Dako公司产品，购于迈新生物试剂公司。 1.3 实验方法：采用免疫组化Envision法染色和DAB显色，用已知阳性的组织切片作实验阳性对照，相同切片以PBS代替一抗作空白对照。石蜡切片常规脱蜡至水，抗原热修复后，分别滴加TGF-alpha;、PCNA和bcl-2一抗工作液，孵育1小时后再以Envision/HRP（即用型试剂）室温孵育30至45min。DAB显色，显色充分后用自来水终止。苏木精复染1 min，常规梯度脱水至封片。 1.4 结果判断：显微镜下随机检测5个独立高倍视野（times;400）。染色强度评分：0分为无色，1分为细胞染色呈浅黄色（轻度），2分为细胞染色呈黄色（中度），3分为细胞染色呈棕褐色（重度）。着色范围以阳性细胞百分比来判定，无阳性细胞表达为0，阳性细胞数为1%～25%为1分，阳性细胞数为26%～50%为2分，阳性细胞数为51%～75%为3分，阳性细胞数为75%～100%为4分。上面两项相加为分级标准：阴性计0～1分，弱阳性（+）计2～3分，阳性（++）计4～5分，强阳性（+++）计6～7分。 1.5 统计学方法：应用SPSS15.0统计软件包统计，各组样本间的比较采用chi;2检验，以Plt;0.05为显著性差异。 2 结果 2.1 TGF-alpha;免疫组化染色结果：TGF-alpha;阳性反应定位于细胞浆，阳性着色呈棕黄色至棕褐色。10份正常皮肤组织中有1份在胞浆中可见TGF-alpha;表达为阳性，其余均为阴性。TGF-alpha;在皮肤混合瘤组织中阳性表达高于正常皮肤对照组，差异有统计学意义（Plt;0.05），见表1。 表1 TGF-alpha;免疫组化染色结果（n） 2.2 PCNA免疫组化染色结果：PCNA阳性反应定位于细胞核，阳性着色呈棕黄色至棕褐色。10份正常皮肤组织中有2份在胞浆中可见PCNA表达为阳性，其余均为阴性。PCNA蛋白在皮肤混合瘤组织中阳性表达高于正常皮肤对照组，差异有统计学意义（Plt;0.05），见表2。 表2 PCNA免疫组化染色结果（n） 2.3 bcl-2免疫组化染色结果：bcl-2阳性反应定位于细胞浆，阳性着色呈棕黄色至棕褐色。10份正常皮肤组织中有1份在胞浆中可见bcl-2表达为阳性，其余均为阴性。bcl-2在皮肤混合瘤组织中阳性表达高于正常皮肤对照组，差异有统计学意义（Plt;0.05），见表3。 表3 bcl-2免疫组化染色结果（n） 3 讨论