脑缺血动物模型建立的研究进展.docVIP

精品论文 参考文献 脑缺血动物模型建立的研究进展 田兆华1　刘柏炎2　郑东升1（1广州市白云区中医医院内二科 广东广州 510470)（2湖南中医药大学中医内科实验室 湖南长沙 410007) 随着现代社会压力的增大及饮食结构的改变，脑血管疾病逐渐成为人类发病率最高的疾病之一。因此，制作较为可靠的脑缺血动物模型，并进行相关的实验研究，对预防及治疗脑血管疾病具有重要的意义。 1 实验动物选择 大鼠是公认的建立脑缺血模型的首选动物之一，这是因为：大鼠品种多，易于饲养，价格低廉，脑血管解剖和生理机能接近于人类；而且生命力较强，易施低温固定技术和组织生化分析。 2 全脑缺血模型 2.1 两血管闭塞法 Smith等[1]通过夹闭双侧颈总动脉(CCA)合并低血压以减少脑血流量，造成急性脑缺血的方式建立全脑缺血模型。脑组织缺血程度可以通过测定脑血流量(CBF)反映出来。对于探讨人类缺血性脑损伤的发病规律，评价抗脑缺血药物的疗效等有价值。但其无法研究血管狭窄后行为学的变化；而且脑缺血时限长，有时导致脑缺血后抽搐、癫痫等并发症的发生。 2.2三动脉阻断法 通过结扎延髓腹侧面上的基低动脉，通过双侧CCA的关闭和开放实现全脑缺血再灌流。该法成功率高，缺血指标的观察明确简单，可通过阻断CCA时间的长短控制脑缺血的程度。被认为是至今为止较理想的全脑缺血再灌流的动物模型。该模型广泛用于脑缺血的药物及方法的研究。 2.3 四血管闭塞法 Pulsinelli等[2]在1979年通过阻断双侧CCA及椎动脉血流成功建立了四血管闭塞法大鼠全脑缺血模型。其可以明确检验缺血是否成功，可进行再灌流损伤的研究。但手术较复杂，实验操作的熟练程度直接影响实验效果。 2.4 其它 如颅内加压法、颈部加压法、断头法、低氧法及胸内血管夹闭法等，但这些方法都有不同程度的局限性，一般在实验研究中较少使用。 3 局灶性脑缺血模型 3.1 开颅法 Tamura等[3]采用分离近端大脑中动脉(MCA)，电凝或用手术丝线结扎MCA，造成脑梗塞，是目前公认的标准MCA闭塞模型。以大脑皮层、尾状核缺血最明显。但其需要开颅，对实验动物创伤性较大，并且无法观察造模后行为学改变。 3.2 光化学法 Watso等[4]首次建立了光化学法诱导脑皮层梗塞的动物模型。主要是经尾静脉注射光敏材料荧光素，特定光源照射后激发光化学反应，引起照射部位皮层血管内皮细胞毒性脑水肿而导致脑梗塞。但其与常见脑栓塞存在差异，不利于进行药物实验观察。 3.3 栓塞法 通过向颈动脉注射血凝块栓子建立的脑缺血模型。此模型适于血栓形成过程的研究和溶栓治疗的观察。但由于栓子的随机性，而无法预测梗塞部位及大小。 3.4 插线法 Koizumi等[5]于1986年首次采用颈总动脉插入尼龙线栓建立大脑中动脉闭塞模型并获得成功。Longa等[6]于1989年将其方法改进，即每只大鼠按400mg/kg体重腹腔注射三氯乙醛进行麻醉，将一段30mm长的4-0尼龙线栓的一端用酒精灯烧灼至钝圆，从颈总动脉分叉处远端插入至颈内动脉管腔约17～18mm，至有阻力感为止，缺血诱导后120min后抽出线栓进行再灌注。后来学者多按其方法造模。此方法有利于观察脑缺血后动物行为学变化，以及进行药物干预研究，但需操作熟练，线栓插入太浅大鼠无反应，造模不典型、不成功，插入太深，则会插破大脑血管，导致大鼠蛛网膜下腔出血（SAH），且该模型属栓塞性脑卒中，与人类常见的脑卒中有所差别。 4 脑缺血损伤的影响因素 脑缺血损伤还受其它一些因素影响，如大鼠的品种、血糖浓度、脑温、脑血流量以及血压等，须在造模及实验过程中注意避免这些因素的干扰，尽量减小实验误差，使实验数据更加准确。 大鼠脑缺血模型已经应用到多项实验研究当中，例如干细胞的研究、缺血性中风的治疗等，应根据实验目的选择合适的模型制作方法，较熟练的掌握造模技术，不但可以节省实验时间，而且还可降低大鼠的死亡率、节约科研经费等。总之要熟练掌握并运用造模技术，造出符合标准的脑缺血模型，为下一步实验研究打下基础。 参考文献 [1] Smith ML，Bendek G，Dahlgren N et al.Models for studying long-term recovery following forebrain ischemia in the rat:2.A 2-vessel occlusion model.Acta Neurol Scand，1984，69(