背根神经节中FcγRⅠ受体参与神经病理性疼痛的机制研究.docVIP

精品论文 参考文献 背根神经节中FcγRⅠ受体参与神经病理性疼痛的机制研究 郭雯雯1 梁映霞1（通讯作者） 于剑锋1 田立2 王立凤 1 （1潍坊医学院 山东潍坊 261053；2潍坊市中医院 山东潍坊 261041） 【摘要】目的 观察坐骨神经慢性压迫性损伤（chronic constriction injury of the sciatic nerve, CCI）对大鼠背根神经节（dorsal root ganglion, DRG）中Fc段gamma;受体Ⅰ型（Fc-gamma receptor type Ⅰ, Fcgamma;RⅠ）表达的影响，初步探讨其参与神经病理性疼痛的机制。 方法 35只雌性Wistar大鼠随机分为7组（n=5）：空白对照组（Control）、假手术组(Sham 3d,7d,14d组）、手术组(CCI3d,7d,14d组）。分别于术前、术后1d,3d,7d,10d,14d测定各组大鼠热/机械痛阈，并用Western blotting方法检测术后各规定时间点DRG中Fcgamma;RⅠ表达变化。结果 Control组和Sham组间热/机械痛阈和Fcgamma;RⅠ蛋白表达无统计学差异（P＞0.05），CCI组大鼠热/机械痛阈明显下降（P﹤0.01）伴DRG中Fcgamma;RⅠ表达量增多(P﹤0.05)。结论 DRG中Fcgamma;RⅠ蛋白表达上调可能参与神经元兴奋性的提高，在神经病理性疼痛的形成与维持中发挥重要作用。 【关键词】坐骨神经慢性压迫性损伤 Fc段gamma;受体Ⅰ型 背根神经节 神经病理性疼痛 大鼠 【中图分类号】R745.4+2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）04-0077-03 Fc段gamma;受体(Fc-gamma receptor,Fcgamma;Rs)是免疫球蛋白G（immunoglobulin G, IgG）Fc段的细胞受体。二者结合后可产生吞噬作用、抗体依赖性细胞毒作用、释放细胞因子、细胞脱颗粒、活化补体等作用[1，2]。Fcgamma;Rs至少可分为三类，Fcgamma;RⅠ（CD64）是IgG的唯一高亲和力受体，而Fcgamma;RⅡ（CD32）和Fcgamma;RⅢ（CD16）则为低亲和力受体。 众所周知，Fcgamma;Rs在免疫系统中广泛存在。近年来研究发现传统意义上的免疫赦免区-神经系统中也有IgG和Fcgamma;Rs的普遍分布及表达[3]。临床发现，低剂量静脉注射免疫球蛋白（intravenous immunoglobulin, IVIG 0.5g/kg/d）对慢性疼痛、复杂区域疼痛综合征、干燥综合征相关性神经病疼痛及糖尿病神经病理性疼痛有缓解作用，且无明显不良反应[4，5，6，7]。据此推测神经系统内分布的Fcgamma;Rs可能在Ig镇痛过程中发挥桥梁作用。 Andoh和Kuraishi[1]研究发现，体外培养的小鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元细胞有IgG高亲和力受体Fcgamma;RⅠ表达，而没有低亲和力受体Fcgamma;RⅡ、Fcgamma;RⅢ表达。本实验采用蛋白定量技术检测神经病理性疼痛模型大鼠DRG中Fcgamma;RⅠ表达的变化。 1 材料与方法 1.1 实验动物 成年健康雌性Wistar大鼠35只（180～220g），购自山东鲁抗医药股份有限公司。于安静、温暖、湿度适宜的环境中分笼饲养，每日光照12h，自由进食、饮水，适应环境一周后进行实验。 1.2 主要仪器和试剂 1.2.1 仪器 Electronic Von Frey刺激仪（IITC Inc.美国），SW-200光热尾痛测试仪（成都泰盟科技有限公司），PRO200型精密组织匀浆器（上海季诺科贸有限公司经销），Eppendorf台式高速冷冻离心机（德国），680型全自动酶标仪（美国Bio-Rad公司），JY600C型电泳仪（北京君意东方电泳设备有限公司），Transference Decoloring Shaker TS-8(海门市其林贝尔仪器制造有限公司)，XJX-Ⅱ型X射线摄影暗匣（上海跃进医用化学仪器厂）。 1.2.2 试剂 SDS蛋白上样缓冲液、彩色预染蛋白质分子量标准、超敏ECL化学发光试剂盒（碧云天）, 山羊抗CD64抗体（Santa Cruz, CA）,辣根酶标记兔抗山羊IgG、小鼠抗beta;-actin抗体 、辣根酶标记山羊抗小鼠IgG（北京