生物化学与检验3.ppt

第三章 生物化学检验实验室基本知识 ;本章内容概要：;教学目的和要求：;第一节 实验用纯水;一、纯水的制备方法 ;离子交换法：;电渗透法; 1、不需要消耗化学药品，设备简单，操作方便。 ;炭吸附法:;1、设备简单，操作方便。 ;超滤膜法;混合纯化系统;二、水的纯度检查 ;;;Ⅱ级水:临床实验室用水,一般实验检验; Ⅰ级水:特殊实验如酶活性测定、电解质分析等; Ⅲ级水:用做仪器、器皿的自来水清洁后冲洗. ;实验用纯水的贮存、运输和使用:;第二节 实验用玻璃仪器(了解) ;第三节 实验方法的选择;一、实验方法选择的目的;二、实验方法的分级;;应用： 由于技术要求太高，费用昂贵，这类方法不直接用于鉴定 常规方法的准确性，只用于评价参考方法与一级标准品。;（二）参考方法reference method;应用： 能在条件优越的实验室作常规分析，主要用于鉴定常规方法，评价其误差大小、干扰因素并决定是否可以被接受；用于鉴定二级标准品和为质控血清定值；用于 商品试剂盒的质量评价。;（三）常规方法（routine method ）; 项目 ;三、标准试剂的分级;标准品的分级：;;（二）二级标准品（次级参考物）;（三）控制物（质控物）;决定性方法 一级标准品 参考方法 二级标准品 常规方法 控制物;四、实验方法选择的原则; 　　尽量选用国内外通用方法或推荐方法，便于方法 的规范化和质量控制，重点考虑实用性和可靠性。;;五、实验方法选择的步骤;初步试验包括：简单 标准曲线和重复性 质控血清和新鲜标本的重复实验 析浓度不同的标本，并与公认的参考方法的结果对比.;;;系统误差（systematic error， SE） ;分类: CE：指由干扰物引起的使测定值与真值存在恒定大小的误差，误差大小与被测物浓度无关，而与干扰物浓度相关。 PE：指相对于被测物浓度有相同的百分比误差，误差的绝对量与被测物浓度成正比。 ;随机误差（random error，RE） ; 由测定仪器、试剂、环境等实验条件的改变以及分析人员操作习惯等因素的变化而引起。;(二)实验误差的表示方法：;相对误差和相对偏差：;48;;;;分类：;连续测定的精密度：;重复性精密度： ;再现性精密度;（二）准确度：;影响因素： 　　　系统误差、随机误差（了解）;;;;（一）重复性试验;(二)回收试验;回收浓度=分析标本测得浓度 - 基础标本测得浓度　（实际测得值）;注意事项： 吸量准确； 加入标准液后，其实验样品的被子测浓度最好达到医学决定水平； 总浓度必须在方法分析范围内； 需加入高中低不同浓度回收试验，计算平均回收率； 加入标准液的体积一般在10%内； 重复2-3次。;(三)干扰试验;试验的方法:;注意事项 被试验的物质：胆红素、溶血、防腐剂、抗凝剂、药物等 可疑干扰物的浓度：干扰物浓度有可能达到病理标本最高浓度值。 本试验检测的误差包括方法特异度不高和干扰物作用引起的误差。 消除干扰常用方法 空白对照：试剂空白：常见 　　　　　　　标本空白：内空白法和外空白法 物理、化学方法分离干扰物 双波长或多波长法检测排除干扰 误差较大又无法消除，则改进或更换方法。;(四)方法比较试验（对比试验）（熟悉）;①在进行临床化学常规方法的评价时，最好选择参考方法作为比较方法 ②若采用已知偏差法，则有部分误差来自比较方法（与已知偏差 一致的那部分误差），剩余的则属于侯选方法。 ③若采用未知偏差法，分析误差可能来源于二者之一或两者都有，难以分析。;方法学评价实验小结;;（一）方法学性能指标：;　　制定性能标准，要反映临床应用与解释结果的要求（医学效用限度），又要基本符合实验室所能做到的技能状态。;（二）方法性能判断指标：;１、单值判断指标;（１）９０％可信区间、９５％可信上限和可信下限：;假如，Ｅu ＜ EA ，则方法性能为可接受； 假如Ｅl ＞EA，则方法必须改进，以减少误差，否则排除。 假如Ｅu ＞ EA ，但Ｅl ＜ EA ，说明仅有的数据不足以作出任何有关可接受性的结论，还需继续实验以收集更多的数据，以便对分析误差作出较好的估量 ;２、可信区间判断指标计算公式：;;第五节 实验的诊断性能评价 ;诊断性能评价：;一、参考值和医学决定水平;;　 水平１：提示需要进一步检查的阈值 水平２：提示需要治疗措施的界点 水平３：提出预后或要紧急处理的界值;二、诊断灵敏度、特异度、预测值和似然比;诊断试验和金