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果蝇培养基配制
果蝇培养基配制水产动物育种与增养殖实验室2014-2015学年春季学期田雪 马晓一、实验目的了解果蝇实验几种常用培养基配制方法;掌握玉米粉培养基配制方法。二、实验原理果蝇在水果摊或果园里常见,它不以水果为生,而是食生长在水果上的酵母菌,因此实验室内凡能发酵的基质,均可作为果蝇饲料。三种常见的果蝇培养基成分玉米培养基米粉培养基香蕉培养基水/ml5007548琼脂/g7.52.01.6白糖/g5010—香蕉浆/g——50玉米粉/g57.5——米粉/g—7—麸皮/g—7—酵母粉/g2.51.41.4苯甲酸/ml0.25——三、实验步骤A:琼脂7.5克加入300毫升水中煮沸溶解,加入白糖50克,搅拌均匀; B:玉米粉57.5克,加入200毫升水中搅拌加热成糊状;将B慢慢倒入A中,并不停搅动混合,加热成糊状后,再加苯甲酸(用乙醇溶解),继续煮2min;配制好的培养基立即分装灭菌,每瓶培养基厚2~3cm,灭菌前在每一瓶内加入一牛角勺酵母粉,改善瓶塞,报纸封口,进行灭菌。 培养果蝇的饲养瓶,常用的有牛奶瓶,大中型试管,并用纱布包裹的棉花球作瓶塞。 试管棉塞不但能保护试管内物质不受外界微生物污染,并且能保证管内有供果蝇呼吸的气体。4. 培养基的分装将熬制好的培养基分装到广口瓶中。5. 培养基的灭菌(1)灭菌前的准备:将高压蒸汽锅的内桶取出,向外锅内加入适量的水,将内桶放入。(2)装放待灭菌物品:将已包扎好的培养基放入内桶。盖上锅盖。(3)加热排气:接通电源,同时打开排气阀,待见有大量水汽排除时,维持3~5min,锅内空气排尽,关上排气阀。(4)升温保压:压力为1.05kg/cm2,121.3℃,20~30min(5)出锅,隔断热源,自然降温,待压力表指针回到零,打开排气阀,稍等一些时间,再开盖取物。
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