心房钠尿肽前体A基因多态性与高血压病人肾功能及冠心病发生的关联研究.docVIP

精品论文 参考文献 心房钠尿肽前体A基因多态性与高血压病人肾功能及冠心病发生的关联研究 杨光1 郭实2 权欣3 1、首都医科大学教学医院 北京石景山医院心内科 100043 2、北京中医药大学东直门医院心内科 100700 3、中国医学科学院阜外心血管病医院超声科 100037 【摘要】目的：本研究对高血压病患者的NPPA G664A 基因突变进行检测，分析该位点与肾功能损伤及冠心病发病的相关性。方法：应用TaqMan 探针法检测 1248 例原发性高血压病患者，按照24 小时尿白蛋白分为尿白蛋白正常组和尿白蛋白组，研究两组间NPPA G664A 分布的差异；并比较NPPA G664A 不同基因型组 间患者尿白蛋白、血压和冠心病发病的差异。结果：尿白蛋白组和正常组NPPA G664A 基因型分布符合Hardy-Weinberg 平衡定律（P 值均gt;0.05），两组基因型分 布差异无统计学意义（Pgt;0.05）。按照显性遗传模型，GG 型患者和GA+AA 患者间24 小时尿白蛋白、收缩压、舒张压无统计学差异（Pgt;0.05）；GA+AA 基因型患 者冠心病的发病显著高于GG 基因型组患者（P=0.002），其中心肌梗死的发病GA+AA 组高于GG 组（P=0.009），心绞痛和心衰的发病无统计学差异。结论：本研 究验证了1248 例原发性高血压患者的NPPA G664A 基因型与肾功能改变不相关。与冠心病的发病有显著的相关性。 关键词：原发性高血压，心房钠尿肽前体A，单核苷酸多态性，冠心病 高血压病有明显的遗传相关性，据估计人群中有20%-40%的血 压变异是由遗传引起的。心房钠尿肽前体A（NPPA）基因己作为研 究疾病遗传易感性的“ 候选基因” 受到人们的关注。NPPA基因定位 于染色体1p36，编码心房钠尿多肽（ANP）的前体。ANP 作为一种 利尿剂控制细胞外液量和电解质的平衡[1]。动物实验数据显示降低 ANP水平可导致盐敏感高血压，而提高ANP水平则可引起低血压[2]。 人群研究表明ANP（以及NPPA基因）与多种心脑血管疾病相关，如 脑卒中、心衰、左心房肥厚及高血压等[3]。 本研究选取NPPA G664A 基因多态性位点在中国汉族人群中进 行检测，并分析与高血压患者冠心病发生和肾功能损伤的相关性。 1 研究对象与方法 1.1 研究对象 2010 年11 月至2012 年1 月间心脏内科门诊和入院的1248 名原 发性高血压病患者。原发性高血压诊断符合1999年WHO/ISH的标准, 经住院病因检查排除继发性高血压和糖尿病患者。按照UAE, 将高血 压患者分成正常尿白蛋白组( UAElt; 30mg/24h)和尿白蛋白组 ( UAEgt;30mg/24h)。 试验经本院伦理委员会批准后展开。所有入选患者均签署知情同 意书，同时临床资料证实无其他预期会影响研究的疾病。所有研究对 象为汉族人，相互之间无血缘关系及异族通婚史。患者基本资料见表 1。 表1 尿白蛋白组和尿白蛋白正常组临床及实验室基线资料(Mean plusmn;SD) 1.2 生化检测 患者清晨抽取空腹肘静脉血5 mL，检测空腹血糖、血肌酐、甘 油三酯、总胆固醇和尿酸水平，采用全自动生化分析仪（日立1600-020 型）测定。所有研究对象留取24 小时尿，正在接受ACEI 或ARB 药 物治疗的患者, 改用口服alpha;-受体阻滞剂2 周后留取尿，用免疫比浊法 测量尿白蛋白（UAE）（ug/24h），采用Cobas Mira Plus 分析仪（Roche） 检测。 1.3 冠心病事件 以患者入院诊断和历史病例为准，心绞痛、心肌梗死和缺血性心 肌病患者收入。脑卒中、糖尿病和肾衰等病人被排除。 1.4 基因型检测 1.4.1 DNA 的提取：采用QIAGEN 人基因组提取试剂盒（德国 QIAGEN公司），按照操作手册提取外周静脉血白细胞DNA。 1.4.2 NPPA G664A基因型检测：采用ABI TaqMan 探针法（美国 ABI 公司）检测样本基因型。PCR 扩增在ABI 荧光定量PCR 仪7900 （美国ABI 公司）上完成，反应体系为5mu;L，含1mu;L 浓度为10ng/ mu;L的DNA，20times;TaqMan 引物探针混合液0.25mu;