乳腺癌免疫组织化学染色及质量控制分析.docVIP

精品论文 参考文献 乳腺癌免疫组织化学染色及质量控制分析 敖永琴 　　(重庆市丰都县人民医院 重庆 丰都 408200） 　　【摘要】 目的：对乳腺癌免疫组织化学染色及质量控制进行分析探讨，为今后的临床病理工作提供有价值的参考信息。方法：选择2013年1月～2015年12月，我院收治的乳腺癌患者56例作为研究对象，取乳腺组织标本展开免疫组化学染色，并实施有效的质量控制措施，观察乳腺切片标本以及检验结果。结果：乳腺组织切片没有出现收缩干裂现象，组织结构细胞形态相对清晰，能够对乳腺癌细胞、炎症细胞予以清晰的辨别。HE染色鲜艳，细胞核染色结果显示，颜色为鲜明蓝色。结论：免疫组化染色对乳腺癌的病理检查具有重要意义，染色结果可为临床诊断提供可靠的参考依据，值得关注并推广。 　　【关键词】 乳腺癌；免疫组织化学染色；病理；质量控制 　　【中图分类号】R655.8 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）13-0153-02 　　临床上，乳腺癌为女性常见恶性肿瘤，临床诊断多依赖病理检查。免疫组织化学染色为病理诊断中应用较广的一种诊断方式，为临床诊断中常用的辅助性参考指标，病理技师为免疫组化的操作者与质量控制的执行者，对免疫组化诊断的准确性具有重要意义[1]。本次研究中，出于对乳腺癌免疫组织化学染色及质量控制进行分析探讨，为今后的临床病理工作提供有价值的参考信息，对我院收治的乳腺癌患者采取免疫组化法进行染色诊断，并对检查结果进行回顾性分析，结果汇报如下。 　　1.资料与方法 　　1.1 一般资料 　　研究中资料来源于我院收治、且符合病理诊断标准的乳腺癌患者，选择其中的56例作为研究对象，均为女性，年龄34～67岁，平均（47.6plusmn;12.1）岁。 　　1.2 方法 　　1.2.1研究方法 选择2013年1月～2015年12月，我院收治的乳腺癌患者56例作为研究对象，取乳腺组织标本展开免疫组化学染色，并实施有效的质量控制措施，观察乳腺切片标本以及检验结果。 　　1.2.2操作步骤 实验试剂：PBS液,第一抗体为兔抗人雌激素受体（ER）、兔抗人孕激素受体（PR）、均为细胞核着色，兔抗人CerbB-2单克隆抗体，为细胞膜着色。第二抗体为快捷免疫组化Elivision试剂盒，DAB试剂盒。 　　①组织切片。取受检者乳腺标本，经浓度为10%的中性甲醛进行固定，取病变组织，经酒精梯度脱水，二甲苯透明、石蜡浸润包埋，制成蜡块，切片，厚度在2～3um之间，而后展片，保证切片展开充分，然后采取APES防脱片处理过的载玻片捞片，最后在65℃条件下温箱烤片，持续2～4小时。 　　②免疫组化染色：烤片完成后，经二甲苯脱蜡、酒精梯度浓度脱水，后经蒸馏水洗，PBS液将切片浸泡2min，连续操作3次，浓度为3%的过氧化水浸泡5～10分钟，从而将内源性过氧化物酶活性予以消除。PBS浸泡2分钟，连续3次，在高压锅内放置柠檬酸缓冲液，加热至沸腾，然后将切片放置在高温塑料切片架上，放入锅内，将锅盖盖好，继续加热，加热完成后压力锅离开水源，冷却后采取二步法，保证切片不含有生物素，避免生物素造成非特异性背景染色，修复后切片采取PBS液清洗2次，滴加一抗工作液，在37℃条件下孵育1小时，PBS液清洗3次，滴加二抗，37℃条件孵育15～20分钟，最后经PBS液清洗3次，DAB显色。复染，封片。 　　1.3 结果判定 　　在癌细胞胞质或胞膜上出现黄染颗粒视为染色结果为阳性。其中颗粒呈现淡黄色,且均匀视为染色结果呈现弱阳性（＋）；颗粒呈现黄色，分布较不均匀视为染色结果呈现中度阳性（＋＋）；颗粒呈现深黄或者是褐色，块状视为染色结果呈现为强阳性（＋＋＋）。 　　1.4 免疫组化标准化管理 　　①检测方法选择。免疫组化检测方法较多，多为生物素型，非生物素型两类，由于组织中含有内源性生物素，因此会对免疫组化染色进行干扰，生物型检测过程中，应对内源性生物素进行干扰。②免疫组化操作标准化。现阶段，免疫组化染色包括手工操作、全自动免疫组化仪器操作两种，手工染色时，一定程度上会受实验员因素的干扰。全自动免疫组化仪的问世，避免了人为因素干扰，使染色结果可靠性得以保证，对于免疫组化质量控制有益。③阴性与阳性对照。在每次免疫组化染色中，应严格设立阳性对照、阴性对照。 　　2.结果 　　乳腺组织切片没有出现收缩或者是干裂现象，组织结构细胞形态观察清晰，乳腺癌细胞、炎症细胞均可获得清晰的辨别，经HE染色后，颜色鲜艳，细胞核呈现为鲜明的蓝色，细胞质伊红染色，呈现深浅不同的粉红色，细胞核呈现不同程度的蓝色，对比度鲜明，免疫组化染色结果显示，病变组织结构完整，未发生明显的脱片状况，阴性与阳性存在鲜明的对比，阳