RHDV VLPs单克隆抗体的制备及其识别表位的初步定位.pdfVIP

- C T ● liliRICULTURAE 华北农学报·2015，30(5)：65—70 BO附l卜$1HIe● 宋艳华，胡 波，范志宇，彭 伟，魏后军，薛家宾，徐为中，王 芳 (江苏省农业科学院兽医研究所，农业部兽用生物制品工程技术重点实验室，国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏南京210014) 摘要：为了筛选兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白(VP60)的特异性单抗，并进一步分析单抗识别表位的分布情况， 可组装成病毒样粒子(VLPs)。将RHDVVLPs作为免疫原与等量弗氏佐剂乳化，免疫BALB／c小鼠，取脾细胞与SP2／O 骨髓瘤细胞融合，经3次亚克隆后，获得11株能稳定分泌抗RHDVVLPs抗体的阳性杂交瘤细胞株。间接ELISA、IFA 和WesternBlot鉴定结果表明，这ll株单克隆抗体均能够特异地识别RHDVVLPs和天然RHDV。11株单抗均为 VP60的 NTA区，5F3针对RHDV VP60的P区。 研究为RHDVVLPs抗原表位的鉴定和RHDV结构功能的研究奠定了基础，同时为RHDV的检测和新型疫苗研究提 供物质基础。 关键词：RHDVVLPs；单克隆抗体；表位；初步定位 中图分类号：$858．2912．65文献标识码：A 文章编号：1000—7091(2015)05—0065—06 doi：10．7668／hbnxb．2015．05．01l and the of PreparationPrimaryMappingEpitopes MonoclonalAntibodiesRHDVVLPs Against SONG Yan—hua，HUBo，FANZhi—yu，PENGWei，WEI Hou-jun， XUE Jia—bin，XU Wei—zhong，WANGFang of of of (Institute VeterinaryMedicine，JiangsuAcademyAgriculturalSciences，KeyLaboratoryVeterinary and of ResearchCenterof BiologicalEngineering Agriculture，National Technology，Ministry Veterinary and 21001 BiologicalsEngineeringTechnology，Nanjing4，China) select mAbsforthe Rabbit disease Abstract：To specific capsidprotein(VP60)ofhemorrhagic andfurther thedistributionof recombinantbaculovirusesrAcV— analy