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七氟烷对小鼠早期胚胎发育的影响 1、相关定义 1.1、再克隆技术的概念和意义 再克隆是指将发育到囊胚期前的克隆胚胎卵裂球或者克隆动物的体细胞作 为核供体细胞注射入去核的卵母细胞中,从而获得遗传性状相同的克隆动物的过 程。由于体细胞核移植胚胎在发育过程中的重编程不完全,导致核移植胚胎发育 停滞或者不能发育成正常的个体[54]。Armstrong 等认为如果把供体核多次注入去 核的卵母细胞中,可能会促进供体核的重编程,进而使胚胎的发育能力有所提高。 目前,已经获得了猪、小鼠、山羊、牛等多种再克隆动物。而且已经成功得第 6 代克隆鼠。牛的胚胎也已经连续克隆到了第 6 代,并且获得了第 3 代连续克隆牛。 对猪来说,也已经成功获得了第 3 代克隆猪。对小鼠的再克隆研究发现,随着克 隆代数的不断增加,染色体端粒的长度也在增加。但也出现了相反的结果,对于 绵羊,山羊,牛的研究表明,随着克隆代数的不断增加染色体上的端粒长度逐渐 缩短。但也有研究证明在猪的连续克隆后代中,染色体的端粒长度不发生变化。 一些学者认为再克隆对重编程会产生不利的影响,再克隆会引起一些不利的表观 遗传修饰在后代中产生积累。但也有实验证明连续克隆促进了胚胎的重编程。 Kayama 等人在对小鼠的连续克隆研究中发现,随着克隆代数的增加,克隆 效率会越来越低;美籍华人杨向中等通过对公牛连续克隆的研究,也发现克隆效 率随着克隆代数的增加而下降。在已经制备的转基因克隆山羊中,外源基因的表 达效果也不相同。Baguisi 等人用转基因山羊 F 代的胎儿体细胞克隆得到克隆羊, 外源基因的表达量与其 F 代转基因山羊的表达量不相上下。Keefer 等人把绿色荧 光蛋白基因转入山羊胎儿成纤维细胞中,克隆得到一只转基因克隆山羊,但在转 9 基因克隆山羊的细胞中不能直接检测到绿色荧光蛋白基因的表达。 通过克隆技术可以很快地生产出转基因动物,还可以将表达效果较好的转基 因动物进行克隆、再克隆以快速扩大群体。在理论上,通过克隆技术可以将一只 转基因动物扩大成一个种群而不用担心外源基因的丢失。目前研究表明,体细胞 克隆动物体内普遍存在着印记基因表达异常、甲基化异常等情况。用克隆动物的 体细胞进行再克隆时,目前还不能确定其基因组上的异常是否会引起重编程的失 败。还有一种可能,类似于早期胚胎细胞的连续核移植,由于供体核多次暴露在 卵母细胞质中,使误差得以被修复,进而提高了核移植的效率。将克隆动物进行 再克隆,可以更好地研究体细胞积累的变异对个体发育、健康和繁殖的影响[59]。 10 第 3 章 小分子化合物对细胞重编程的影响 1.2、转录组与转录组学定义 转录组(Transcriptome)的概念,最早出现在 Velculescu 和 Kinzler 等人研究酿酒 酵母细胞转录组的文章中(Velculescu 等,1997)。广义上,转录组是指在一定的生理 或环境条件下,某一生物个体或一类细胞中由一套基因组转录产生的所有 RNA 分子集 合,包括 mRNA、tRNA、rRNA、miRNA 和 snRNA 等;狭义上,仅指所有参与编码蛋白 质的 mRNA(Mortazavi 等,2008)。 转录组学(Transcriptomics),主要研究由基因组产生的所有转录产物的种类、结 构和功能,也是从整体上揭示活细胞内各种功能基因的转录情况及其转录调控的规 律。由于转录组学的研究不是限定于研究一个或者几个基因,而是研究一整套基因, 即在 RNA 水平上研究所有基因的表达状况,所以转录组学不仅改变了以往的单个或者 几个基因的研究模式,还使得功能基因组学的研究步入了一个蓬勃发展的新时代(吴 琼等 2010)。 1.3、相关概念 (一)土地市场与房地产的概念 1、土地市场 关于土地市场的内涵,国内己有的文献中主要有三种:一是土地市场是不动产市 场的一部分,有学者亦将土地市场称为地产市场(周诚,1993)。这种观点认为,地 产是指土地财产,即作为财产的土地,以区别作为自然物和生产资料的土地,但事实 上,土地市场还存在土地股票、土地债券等证券形态的土地,因此这种表述并不完整; 二是土地市场是要素市场(毕宝德,1994)。这是因为土地是经济活动中最基本的生 产要素,由于土地不能像一般商品那样流通,因此这种观点过于简单;三是土地市场 是产权市场(毕宝德,2002;刘书楷,2004)。这种观点认为土地市场交换的客体, 不是土地本身,而是各种内涵不同的土地权利。对比以上三种观点不难看出,第三种 观点对土地市场的诊释最为确切,因为,土地市场中流通的实际是土地产权,不同权 利因内涵不同而在交易中具有不同的价格。 综上所述,土地市场是指土地作为最基本的生产要素,在土地产权流动中所发生 的土地供求双方关系以及整个产权交易