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HBV-DNA定量检测对乙肝父婴及母婴传播探究 　 作者：潘大虎，翟海燕，宋农，张丽丽，周军，罗芝莹 【摘要】 目的 测定HBV阳性父亲和母亲及新生儿HBV-DNA的含量，研究父婴和母婴传播与HBV-DNA含量的关系。方法 运用实时荧光定量PCR方法检测HBV表面抗原（HBsAg）阳性的父亲和阳性的孕妇血液中HBV-脱氧核糖核酸（HBV-DNA）以及脐血HBV-DNA且新生儿给予乙肝疫苗全程接种至1岁时，检测HBV-DNA，并根据父母HBV-DNA含量的不同分别分为A1(HBV-DNA＜1.0×103 Copies/ ml)、B1(HBV-DNA为1.0×103～1.0×107 Copies/ ml)、C1(HBV-DNA＞1.0×107 Copies/ ml)组，父母为A2(HBV-DNA＜1.0×103 Copies/ ml)、B2(HBV-DNA 1.0×103～1.0×105 Copies/ ml)、C2(HBV-DNA ＞1.0×107 Copies/ ml)组。结果 脐血HBV-DNA阳性率：A1组为24.32%、B1组为38.71%、C1组为44.83%，A2组为14.70%、B2组为26.67%、C2组为39.29%。结论 父婴传播与母婴传播均与血清 HBV-DNA含量的高低有关，其HBV-DNA含量越高垂直传播的风险越大。 【关键词】 父亲；母亲；血传病原体；HBV感染；婴儿，新生；疾病传播，垂直 　　慢性乙型肝炎病毒(HBV)是全世界关注的公共卫生问题，我国是乙肝高流行区，其携带者高达10%～15%HBV的围生期传播是重要的传播途径［1］，且母婴传播的发生率和发生机理已早有人报道［2］，为探讨父婴的传播率和传播机理，我们分别选择了97例母亲和92例父亲进行HBV-脱氧核糖核酸(HBV-DNA)检测并随访婴儿，找出父婴和母婴传播的机率和原因，现报道如下。 　　1 资料和方法 　　1.1 一般资料 收集本院2006年1月～2006年10月门诊及住院的HBsAg阳性的父亲92例，母亲97例，其中母亲年龄23～30岁，平均24.3岁，父亲年龄24～31岁，平均26.5岁。根据母亲血清HBV-DNA含量分为A1、B1、C1组，根据父亲血清HBV-DNA含量分为A2、B2、C2组。婴儿分别采集脐血和1周岁时采血，并分别做HBV-DNA测定。 　　1.2 HBV-DNA测定 HBV-DNA定量采用广州达安基因诊断中心提供的7600型荧光定量PCR扩增仪及其配套试剂检测，表面抗原定性采用ELISA法检测，试剂购自于上海科华公司。 　　 　　1.3 统计学处理 计数资料采用χ2检验。 　　2 结果 　　2.1 母亲血清HBV-DNA水平与新生儿脐血HBV-DNA水平的关系 见表1，其中A1、B1、C1组的HBV-DNA阳性率各组间比较差异有显著性（P＜0.05)，这与文献［3］报道的基本一致。 　　表1 母亲血清HBV-DNA水平与新生儿脐血HBV-DNA的关系（略） 　　2.2 父亲血清HBV-DNA水平与新生儿脐血HBV-DNA水平的关系 见表2，其中A2、B2、C2组，HBV-DNA阳性率各组间比较差异有显著性（P＜0.05），这与文献［3］报道的基本一致。 　　表2 父亲血清HBV-DNA水平与新生儿脐血HBV-DNA的关系（略） 　　3 讨论 　　3.1 HBV易母婴传播，而且多数发生在无症状HBV携带者，据估计全世界大约有3亿5000万HBV携带者，因此HBV母婴传播倍受关注，HBV母婴传播率各报道差异甚大［4，5］。本组就脐血的阳性率进行研究可知，随着母血HBV含量的增加感染的几率增加，宫内感染随孕妇血清HBV-DNA含量增加而增高。当母血HBV-DNA＞108 Copies/ml时，即使注射高效免疫球蛋白（HBIG）仍可能有高达43%的宫内感染率，提示孕妇血清HBV-DNA含量的高低是宫内感染的重要因素［6］，因此，用孕妇血清中HBV-DNA含量来衡量其母婴传播的危险性更为可靠，降低血清HBV-DNA含量有望降低母婴传播率［7］。乙肝疫苗联合HBIG效果更好，单纯疫苗需3～4年加强注射，HBIG加乙肝疫苗4～5年也必须加强注射［8］，但应注意到即使这样仍有20%～30%的新生儿接种者未能产生HBsAb或呈现病毒血症及慢性病毒携带状态［9］。 　　　3.2 有报道［10］，在父亲HBV阳性而母亲HBV阴性的引产胎儿发现HBV感染；在父亲HBV阳性而母亲HBV阴性的活产婴儿出生时即检出HBV感染标志。我们通过分组研究定量检测胎儿的脐血HBV-DNA含量可知，的确存在父婴传播并随着HBV-DNA含量的增加感染率增大。乙肝患者的精子中带有乙肝病毒，HBV-DNA可存在于精子头部的细胞浆中，通过受精，就可以在子代细胞