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3种消毒剂对烟草漂浮育苗中TMV钝化效果
3种消毒剂对烟草漂浮育苗中TMV钝化效果摘要:为指导烟草(Nicotiana tabacum L.)漂浮育苗中剪叶工具和旧苗盘消毒剂的使用,采用半叶法测定了3种消毒剂对烟草普通花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)病叶汁液和病苗干根、干叶中TMV的钝化效果,同时运用叶面喷雾法测定了消毒剂常用浓度下烟苗的药害发生率和症状。结果表明,兆冠50倍稀释液处理20 min可完全钝化病叶汁液中的病毒、50倍稀释液可完全钝化病苗风干的细侧根和叶片细条中的病毒;锦钰50倍稀释液处理5 min可完全钝化病叶汁液中的病毒、50倍稀释液可完全钝化病苗风干的细侧根和叶片细条中的病毒;金百万20倍稀释液处理20 min可完全钝化病叶汁液中的病毒、20倍稀释液可完全钝化病苗风干的细侧根和叶片细条中的病毒。常用浓度下金百万基本不产生药害;锦钰和兆冠易产生药害,症状主要表现为退绿斑点、坏死和叶片畸形。 关键词:烟草(Nicotiana tabacum L.);漂浮育苗;烟草普通花叶病毒(TMV);消毒剂;药害 中图分类号:S572 文献标识码:A 文章编号:0439—8114(2012)19—4280—04 目前烟草(Nicotiana tabacum L.)漂浮育苗技术已在我国烟草生产中得到广泛应用,漂浮育苗的一个突出病害就是由烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)引起的烟草花叶病毒病[1]。在烟草漂浮育苗过程中,TMV污染的苗盘和剪叶工具是烟草普通花叶病毒的重要初侵染源[2]。生产上使用的育苗盘具有多孔特性,清洗和消毒较困难,常常黏附有烟苗残体,而TMV在病残体和环境中稳定性强,可在干残体中存活多年[3];同时在烟草育苗期间需剪叶3~5次,且育苗集中度高,一旦有毒源存在,很容易传播,造成病毒大面积侵染。因此,筛选安全、有效的消毒剂对烟草漂浮育苗中病毒病的防控具有重要意义。 前人对育苗过程中的剪叶工具和池水消毒剂分别进行过筛选[4—6],评价了蒸汽[7]、部分药剂对旧漂浮盘残留物中TMV的钝化效果[8],但未对有效消毒剂同时进行病苗残留物(根、叶)和剪叶工具中的TMV钝化效果评价,而消毒剂如能同时用于苗盘和剪叶工具消毒,在实际生产上将更为经济和方便。结合生产实际,选用3种消毒剂模拟剪叶工具和旧育苗盘病苗残留物消毒,比较3种消毒剂钝化病叶汁液和病苗干根、叶中TMV的效果及在常用浓度下接触烟苗的药害症状,以期为烟草漂浮育苗消毒剂的选择和科学使用提供依据。 1 材料与方法 1.1 消毒剂 聚维酮碘水溶剂(金百万),北京东旺农药厂;10%的二氧化氯粉剂(兆冠),潍坊兆冠化工有限公司;中性消毒粉剂(锦钰),贵州遵义泉通化工有限公司。消毒剂现用现配。 1.2 供试烟草和病毒 供试烟草品种K326和Coker 176由贵州省烟草科学研究所提供。K326、Coker 176按常规育苗规程进行管理,K326于成苗期进行药害试验;Coker 176成苗后于室内防虫网盆栽,7~8片叶时用于接种,接种前打顶,去除其他叶片,保留生长整齐一致的3~4片叶;TMV毒源由贵州省烟草科学研究所保存。 1.3 TMV体外抑制效果测定 称取2 g典型TMV病叶,加去离子水和600目金刚砂研磨并稀释100倍,用灭菌纱布过滤后取上清做接种病液。将一定浓度的消毒剂稀释液与TMV病叶汁液等量混合,室温分别接触5、20 min后摩擦接种,接种前喷洒适量金刚砂于叶片表面。左半叶接种去离子水处理的TMV病叶汁液(对照),右半叶接种经消毒剂处理的TMV病叶汁液,每半片叶接种200 μL。接种后清水喷雾冲洗叶面,重复3次。接种5~7 d后统计枯斑数(6个半叶的平均值),计算抑制率。 抑制率=[1—(处理平均枯斑数/对照平均枯斑数)]×100%。 1.4 病苗干根和干叶的消毒剂浸泡处理 根据1.3的试验结果,选用病叶汁液病毒抑制率达100%的消毒剂浓度模拟旧育苗盘的消毒。将风干的TMV病苗的细侧根和叶细条置于小烧杯中,分别加入材料鲜重20倍体积的消毒液浸泡20 min,倒去消毒液,用塑料薄膜密封烧杯口,放置2 d后加入材料鲜重20倍体积的去离子水研磨,过滤取上清液人工接种;对照加入去离子水,其余同处理。 1.5 药害试验 采用160孔苗盘育苗,常规管理,在烟苗成苗期进行试验。消毒剂设200倍、400倍稀释液两个浓度,每一浓度消毒剂设两种处理,施药5 min后清水喷雾冲洗(W)和施药后不用清水冲洗(NW),每处理160株烟苗。采用手持喷雾器每盘喷施消毒液7~8 mL,叶面雾滴均匀无流失。以去离子水处理为对照,药后第7天调查显症株数和药害症状,调查时无明显侵染性病害症状的不正常现象均记录为药害症状。 药
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