五倍子止泻作用实验探究.docVIP

五倍子止泻作用实验探究资料与方法 实验材料：五倍子研为细末，蒸馏水煎煮30分钟过滤，制成含五倍子10%的提取液，调pH至中性；番泻叶用自来水煮沸30分钟，制成20%与50%番泻叶溶液。思密达配制成含量为45%的溶液。昆明小鼠，雌雄各半，体重(18～22)±3g。 五倍子对腹泻小鼠的止泻作用：取小鼠50只，随机分成五组，每组10只，雌雄各半，给药组分别以五倍子提取液6、9、12g/kg灌胃；对照组以0.9%氯化钠20ml/kg灌胃；另一组为阳性对照组，思密达9g/kg灌胃。给药后30分钟，各组均以番泻叶4g/kg灌胃。观察与记录给番泻叶前1小时与给予番泻叶后每小时的排便量(以干粪粒数或稀粪编堆数表示)及有无腹泻(以出现不成形的稀便为腹泻指标)，连续观察8小时。实验过程中小鼠自由饮水和进食。以给予番泻叶后2～3小时的排便量及1～4小时内小鼠的腹泻率为指标作统计学处理。 五倍子对小鼠结肠炎的影响：小鼠30只随机分成三组，每组10只，雌雄各半，0.9%氯化钠20ml/kg灌胃；另两组分别以五倍子和思密达9g/kg灌胃。给药后1小时，三组均以50%番泻叶煎液20ml/kg灌胃。观察与记录各鼠给予番泻叶前1小时与给予番泻叶后每小时的排便量及有无腹泻。于给药后4小时处死各鼠，剖腹后剪取结肠，给予0.9%氯化钠轻轻冲洗肠腔，剪开结肠，用肉眼观察结肠黏膜有无充血，并剪取结肠标本，用10%甲醛溶液固定，做病理切片检查。 结 果 对腹泻小鼠的止泻作用：0.9%氯化钠对照组于给予番泻叶后1～2小时，10只小鼠先后出现腹泻，2～3小时小鼠排便量明显增多，至5～6小时仍有部分小鼠继续腹泻。灌胃五倍子提取液6g/kg和9g/kg两组在给药后4小时分别有7只与3只出现腹泻，4小时后腹泻停止。思密达组在给药后4小时内有3只出现腹泻，4小时后腹泻停止。五倍子12g/kg灌胃组，在给药后3小时内有2只出现腹泻，3小时后腹泻停止。以上给药各组在给予番泻叶后2～3小时小鼠排便量及腹泻率与0.9%氯化钠对照组比较，差别均有显著意义。3个给药组的腹泻率经梯度检验，表明五倍子的止泻作用呈剂量依赖性。该药9g/kg口服止泻作用与思密达的作用相似，差异无显著性。 对腹泻小鼠结肠炎症的影响：0.9%氯化钠对照组小鼠以10g/kg番泻叶灌胃后1～2小时排便量增加，出现腹泻，3小时内10只全部出现腹泻。4小时后处死小鼠，肉眼观察结肠黏膜，充血者9只，其中5只明显充血。病理切片检查表明，黏膜杯状细胞增多，黏膜层增厚，黏膜下层及浆膜充血，黏膜表面可见脱落上皮细胞及黏液。五倍子9g/kg口服后4小时内排便量略有增加，1只出现腹泻，结肠黏膜轻度充血。病理切片检查：黏膜杯状细胞较少，黏膜层增厚较轻或不增厚，黏膜下层及浆膜充血轻，黏膜表面脱落细胞及黏液少。 讨 论 番泻叶为刺激性泻药，能增加肠道推进性蠕动和减少水、电解质的吸收，可用于形成小鼠腹泻和肠炎的模型。五倍子含60%～75%的鞣酸[1]，口服后可与肠道内蛋白质结合形成膜状覆盖于肠黏膜，可减轻炎症因子对肠黏膜的刺激，降低炎症渗出物的渗出[2]，同时保护肠道内正常菌群，有利于肠道炎症的恢复和维持肠道内正常的微生态平衡[3]。五倍子在体外实验对金黄色葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌及伤寒、痢疾、白喉、绿脓杆菌等均有明显的抑菌或杀菌作用，五倍子除鞣酸外尚有其他抗菌有效成分。鞣酸进入机体后几乎全部被分解成醅酸与焦醅酸，极大量可引起肝细胞灶性坏死。这些都为五倍子治疗腹泻提供了参考依据。 参考文献 1 广东中医学院.中医学新编.第1版.上海：上海人民出版社，1971：198. 2 刘海军，李兆申，许国铭，等.十六角蒙脱石对大鼠急性胃肠黏膜损伤的预防和治疗作用.新药与临床，1996，15：260-263. 3 方鹤松.小儿腹泻病的肠道生态关系.中国实用儿科杂志，1996，11(4)：201. 1