丹参传统提取工艺及超临界CO2萃取-大孔树脂联用工艺比较探究.docVIP

丹参传统提取工艺及超临界CO2萃取-大孔树脂联用工艺比较探究摘要：目的：对丹参的传统提取工艺与超临界CO2萃取-大孔树脂联用工艺进行比较研究。方法：SFE-CO2萃取丹参中丹参酮（夹带剂为2倍药材量的95%的乙醇，20MPa、45℃提取1h）；萃取后药渣经水提取-大孔树脂吸附工艺（水提药液盐酸调pH至2，经AB-8型大孔树脂吸附，60%乙醇4倍量洗脱）。对丹参的超临界CO2萃取-大孔树脂吸附联用工艺与传统提取工艺进行了分别研究，以丹参中的丹参酮ⅡＡ和丹酚酸B的提取率为考察指标，比较了有效成分的含量，并比较了两种工艺的得膏率。结果：丹参的超临界CO2萃取-大孔树脂吸附工艺得膏率为6.2%,大大低于传统提取工艺30%的得膏率；前者丹参酮的提取率达到80%以上，后者只有40%左右；两种工艺丹酚酸B的提取率相近，均为80%左右。结论：采用超临界CO2萃取-大孔树脂吸附联用工艺可以有效富集有效部位,提高制剂的载药量。? 关键词：丹参；传统提取工艺；超临界CO2萃取-大孔树脂联用工艺；比较研究? 中图分类号：R285 文献标识码：A 文章编号：1673-7717（2007）04-0736-03 丹参系唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎，具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦等功效。其主要有效成分为水溶性的酚酸类和脂溶性的二萜类物质[1]。其水溶性酚酸类包括丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、迷迭香酸、丹参素、原儿茶醛等，药理研究表明丹参酚酸类具有抗脂质过氧化和清除自由基作用，其中丹酚酸B是含量最高的成分，最具有代表性。脂溶性有效成分主要为丹参酮ⅡＡ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ，它们均具有天然抗氧化、抗动脉粥样硬化、降低心肌耗氧量及抗菌消炎等作用，其中丹参酮ⅡＡ是含量最高的代表性成分。? 丹参的传统提取方法有乙醇回流法和水煎煮法等[2]。实验中对丹参的超临界CO2萃取―大孔树脂吸附工艺与传统提取工艺进行了比较，以丹参中的丹参酮ⅡＡ和丹酚酸B为考察指标，比较了有效成分的含量，并比较了两种工艺的得膏率。传统提取工艺是95%乙醇回流提取，50%乙醇回流提取和水煎煮，这样可以逐级提取丹参中脂溶性成分和水溶性成分，但提取受热时间长，丹参酮破坏较多，且提取得膏率高，影响制剂载药量。超临界CO2萃取其脂溶性成分，工艺简单、萃取时间短，操作温度接近室温，丹参酮几乎不发生降解；对其超临界CO2萃取所得药渣采用水提取-大孔树脂吸附工艺,提取其水溶性成分，可以“去粗存精”,有效富集有效部位,提高制剂载药量，尤其适用于片剂、胶囊剂等的制备。? 1仪器与材料? 丹参药材（购于安徽亳州药材市场，经鉴定），丹参酮ⅡA对照品（中国药品生物制品检定所），丹酚酸B对照品（中国药品生物制品检定所），乙腈为色谱纯（ CALEDON LABORATORILES LTD），甲醇为色谱纯（淮阴精细化工研究院所），水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。? HA-9508型超临界萃取装置(江苏南通华安超临界提取设备公司),CO2气体为食品级(南京气体厂),Waters510型高效液相色谱,486型UV检测器。? 2有效成分的测定? 2.1丹参酮ⅡA的测定? 2.1.1色谱条件[3]色谱柱：ChromasilC18柱；流动相：甲醇-水(75∶25)；体积流量：1.0mL/min；检测波长：270nm；柱温：30℃；进样量：5μL。丹参酮ⅡA保留时间约为37.0min,其它成分不影响。色谱图见图1。? 2.1.2线性关系考察精密称取于60℃干燥至恒重的丹参酮ⅡA对照品1.12mg，置于10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度,制成丹参酮ⅡA标准贮备液（112μg/mL）。采用逐级稀释法再分别配成3.5μg/mL、7μg/mL、14μg/mL、28μg/mL、56μg/mL的系列对照品液，分别吸取上述溶液5μL进样，测定，以峰面积为纵坐标（Y），对照品量（μg/mL）为横坐标（X），绘制标准曲线，得回归方程：? Y＝(1.307×10?4)X＋(5.021)； R＝1.0000。丹参酮ⅡA在3.5～56μg/mL时峰面积与其质量浓度具有良好的线性关系。? 2.1.3供试品溶液的制备①丹参药材供试品溶液的制备[3]：取丹参药材粉末（过三号筛）约0.3g，精密称定，置具塞锥型瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。②超临界萃取物供试品溶液的制备：取经真空干燥后的萃取物6mg,精密称定，置50mL量瓶中，加甲醇超声溶解,稀释至刻度,摇匀,即得。? 2.2丹酚酸B的测定? 2.2.1色谱条件[3]色谱柱:Chro