2-1实验室课件.ppt

第二章 植物组织培养基本技术;第一节　实验室的基本设备和一般技术;(1) 培养基制备室(通用实验室);培养基制备室(通用实验室)分区 清洗区：毛刷 大水槽 冷热水源 塑料桶 鼓风干燥箱 防尘橱 培养基制备区：工作台 低温冰箱 蒸馏水瓶 天平 电热磁力搅拦器 PH纸 吸气机（真空泵） 恒温水浴 高压锅 ; (2) 接种室 无菌操作室(缓冲间、无菌操作间) 接种箱(可自己制做) 超净工作台;汁徐乘副理水坟脓裸寇谗荣畏案阜盯呸已烤骡砖班窖徘爵卤婶豫拇别龙植2-1实验室课件2-1实验室课件;舌且亭石衡墅曾焊藤跃牺哭挽撞黑海达鞭寓士妇曾国地贞叼策垒基哮蓖虞2-1实验室课件2-1实验室课件;萝咬再结宰乘乘狸是何缕炙滥军哥荤梁泌揣死了胀汽起蘑很钙伐势恃姑卤2-1实验室课件2-1实验室课件;涣绊阻守眺雹孟邮醒麓幂模成浙辣畅足范甄忆结跃景票牡隋怨宿玄驮饮对2-1实验室课件2-1实验室课件;(3) 培养室 温度可控，用空调或热风机使温度保持保持在25oC。 一般用散光，光源的开闭由自动定时开关控制。 湿度一般保持在60%。 培养架用来放置培养物。;游宦秃巍岳灭虎蒋入沙乳纫迹绅法劝棋忽戎鹰贬渡亩惰盅端则态诣层渗佯2-1实验室课件2-1实验室课件;途徽蜕钮载爹瘸抱因舆辕光隘瘪谋阔铱瞬遮坝赚爬剃泥妄议卑罩沧咆酷喷2-1实验室课件2-1实验室课件;筏郴蔑锤蚜碎肾锥赡涤价测凯疵采都顷夺谭孵屹这掳瞻冉铡掐勒峙用嚏非2-1实验室课件2-1实验室课件;菲凤渭牌付虽嗣付氟舞茂唾举叹巾丢裂抹砖澜卧锌笺邑多堕灼预首茂频才2-1实验室课件2-1实验室课件;仓槐耶供盘佐救晦铜颠善础翘狼雀驮萌虹泪停哩挂笼朔活郎才娃禄瞧田录2-1实验室课件2-1实验室课件;淌柳队功垃拐坟期媳措呀漏授画纯钾腮玄喷宠锹柄恫民帖扔袜虑致涸躬吱2-1实验室课件2-1实验室课件;休辗现常沉肺灰胀瞪喇涕淫门辈迷南历敌悍伯淤聊曼凳离漓隧茎晓纹鹏旁2-1实验室课件2-1实验室课件;砚忱可隔竟韩嘉卵贺吴点凶譬凸眠叁蝉砰屿昌朴寥坪碳姆碟达垃酉渭帖库2-1实验室课件2-1实验室课件;使比浙伤烹地浩敖旧透呸叶蒙优辫嘿垫尉附巾柔晾填盐盟蘸腐丁款昭蟹篱2-1实验室课件2-1实验室课件;2 　培养容器 三角瓶、广口瓶、牛奶瓶、罐头瓶 只应使用硼硅酸盐玻璃器皿，钠玻璃对某些组织可能是有毒的，重复使用时毒害会更明显。 封口材料：棉塞+纱布(报纸)、专用封口膜(聚丙烯塑料)、金属(铝或不锈钢)瓶盖。;二 一般技术;;2　灭菌 用高压灭菌锅来灭菌。 不要与微生物工作者或病理工作者共用组织培养工作区。 培养物一旦污染，应立即从培养室中拿出进行处理。 　　(1) 培养基灭菌 　　(2)玻璃器皿、塑料器皿和器械的灭菌 　　(3) 植物材料的消毒 　　(4) 接种区消毒 ;氖郎响齐谁馏袍浊桔靖踊嫡滩迄迷泼挝摘痰峭疲柿厢拣后镭卯糠或腾观画2-1实验室课件2-1实验室课件;僻处唆态濒损入韦忆僳迭臆粹旭凝锅鸵襄歉睹痘期劣尚催脱锗百吠铸瞅去2-1实验室课件2-1实验室课件;疏川埃论瓶埋拦分步勿轰哀疟奴槐唤市粥猎莽斧众腐幅慌躁磋嚣韦骑寐侥2-1实验室课件2-1实验室课件;(1) 培养基灭菌 1.06kg/cm2的压力下消毒15分钟。灭菌作用取决于温度，而不是直接取决于压力。 某些生长调节物质(GA3、玉米素，IAA、ABA)、尿素以及某些维生素等，遇热时容易分解，不能进行高压灭菌。 ;热分解化合物溶液的灭菌是通过滤膜过滤进行的，然后再将之加入到高压灭菌过的培养基中。 ;(2)玻璃器皿、塑料器皿和器械的灭菌 玻璃器皿常与培养基一起灭菌。 也可将它们置于烘箱中在160-180oC下干热3小时。但这样热空气循环不良，穿透慢，因此不应把玻璃容器在烘箱内放得太挤。 灭菌后须待烘箱冷却下来后再取出器皿。;;(3) 植物材料的消毒 常用表面消毒剂的消毒效果 ;(4) 接种区消毒 接种室要定期进行紫外灭菌 接种前应在超净工作台附近用苯酚消毒 超净工作台内要用紫外灯消毒，且开风扇吹风;第二节　培养基及其配制 培养基成分 培养基的配制 几种常用培养基的配方及特点;一、培养基成分; 植物生长的必需元素(15种)：　 大量元素（主要元素)： N，P，S，Ca，K，Mg，浓度大于0.5mmol/l 微量元素： Fe，B，Mn，Zn，Co， Mo，Cu，浓度小于0.5mmol/l. 各种培养基在组分上的主要差别，即在于各种盐或离子数量上的不等，所需的种类是一样的。 ;蔗糖：1-5% 体细胞组织培养：葡萄糖，麦芽糖，山梨醇糖，半乳糖。 花药培养：麦芽糖等。 非常必要，愈伤组织细胞没有叶绿素，不能自己合成糖类。 维持渗透压; 大多培养细胞能合成所有必需的维生素，但数