高压氧对体外培养的成骨细胞增殖和分化的影响.pdfVIP

PI la f! 嚣 Ⅵ ．pibb．ac．cn 高压氧对体外培养的成骨细胞增殖和分化的影响半 吴 东112 吴建珊 阎福华D 陈 江D” (t福建医科大学口腔医学院，福州350002；2)福州市第八医院口腔科，福州350013；3)福建中医学院现代医学系，福州350108) 摘要 为探讨高压氧对成骨细胞增殖和成骨分化的影响，把来源于牙槽骨的成骨细胞接种在24孔培养皿中，每孔2 500个 细胞，4个治疗组分别接受不同条件的高压氧治疗，分别是2．4ATA 90 min，2．4ATA 30 min，1．5ATA 90 min和 1．5ATA 30min，每天一次，共1O天．对照组进行常规的细胞培养．分别在高压氧治疗前和高压氧治疗后的1、2、3、4、6、8、 lO天，采用WST．1分析试剂进行成骨细胞的增殖分析．使用乳酸脱氢酶(LDH)毒性分析法检测高压氧对成骨细胞的毒性影 响．另将细胞接种于96孔培养皿中，每孔10 000个细胞，正常培养3天后，改用成骨化培养基，24 h后，两个治疗组分别 接受2．4ATA 90 min和1．5ATA 90 min的高压氧治疗，每天一次共l9次．采用钙沉积分析法、碱性磷酸酶(ALP)活性分析和 Von Kossa染色进行成骨分析．同样的方法观察高压空气对细胞增殖和分化的影响．结果显示，在lO％d~牛血清培养基条件 下，高压氧刺激了成骨细胞的增殖，而在使用2％小牛血清培养基时，并未观察到高压氧对细胞增殖的促进作用．高压氧治 疗前后细胞外乳酸脱氢酶含量没有发生改变，提示了高压氧未对成骨细胞造成毒性影响．另一方面，高压氧增加了骨结节的 形成，同时钙沉积增加，碱性磷酸酶的活力也显著增强，表明了高压氧促进了成骨细胞的成骨分化． 关键词 高压氧，成骨细胞，增殖，分化 学科分类号 R734 高压氧治疗是将病人放置于高压氧舱内进行加 仍然存在着很大的争议 ．在骨折的愈合过程 压，使舱内的气压超过1个大气压，同时让病人吸 中，骨髓细胞迁移并分化为骨祖细胞和成骨细胞， 入纯氧或高浓度氧，使机体得到较高分压的氧气， 不断形成骨基质并最终导致矿化骨的形成是一个重 以达到治疗疾病的目的【u．高压氧用于延迟骨愈 要的新骨形成过程，但是有关高压氧对骨髓干细胞 合、骨不连、放射性骨髓炎等疾病的治疗取得了显 和成骨细胞增殖、成骨分化影响的研究至今未见报 著的效果【2 ．高压氧治疗口腔疾病，如牙周病、 道．本研究的目的在于观察高压氧对体外培养的来 颌骨骨折以及促进种植体骨结合也见报道．研究表 源于人牙槽骨的成骨细胞增殖和分化的影响．研究 明，高压氧在治疗过程中，通过增加局部组织的氧 结果将有助于了解高压氧在促进骨基质形成过程中 分压，进而增加了胶原的合成和新生血管的形成， 的机理，为临床开展高压氧治疗提供理论基础． 最终刺激新骨的形成【sI718】． 1 材料和方法 骨折是临床的一种常见病，重建骨结构是骨折 治疗的主要目标．然而，骨折的愈合过程常常由于 1．1 人牙槽骨成骨细胞的分离和培养 骨缺隙大、断端不稳定、感染、软组织缺乏和血管 成骨细胞分离自人的牙槽骨．牙槽骨取自在澳 形成困难等原因而受到影响 Ⅻ．这些影响常导致 大利亚昆士兰大学牙学院布里斯班牙科医院就诊的 骨不连的发生．对于延迟骨愈合和骨不连，常规的 治疗方法包括骨移植、骨断端的固定、电刺激等方 ·中华人民共和国教育部国家留学基金管理委员会(2003935010)．澳 法．高压氧治疗的方法在骨折[11~15】、骨髓炎[14~1 6j、 大利亚国家医学和健康研究中心基金(NHMRC 199925)和澳大利亚 骨牵张【 71l8】、骨移植【n，-9】和牙种植 等疾病的治疗取 昆士兰州查尔斯王子医院研究基金(FRC0206．22)资助项目． 得了一定的疗效．然而，由于缺乏可信的基础研究 “通