瘰疬清胶囊药效学研究论文.docVIP

　　瘰疬清胶囊药效学研究论文 罗宇慧 彭蕴茹 叶其正 王志刚 石磊 沈明勤 【摘要】 目的观察瘰疬清胶囊对动物的止咳、抗炎及提高机体免疫力的作用。方法①小鼠灌胃瘰疬清胶囊16.0，8.0和4.0 g生药/kg后，采用浓氨水喷雾法进行止咳实验，观察动物咳嗽潜伏期及咳嗽次数。②大鼠灌胃瘰疬清胶囊8.0，4.0和2.0 g生药/kg的后，采用大鼠慢性炎症琼脂肉芽肿法，观察肉芽肿湿重及抑制率的变化，采用角叉菜胶致大鼠足肿胀法.freelg，批号020118-2，苏州医药集团有限公司生产。浓氨水：分析纯，批号981125，益林化工厂生产。乙酰水杨酸肠溶片(阿司匹林)：25 mg/片，批南京第二制药厂生产，使用时以蒸馏水配成浓度为10 mg/ml的药液供灌胃给药。琼脂：批号980424，中国药品生物制品检定所。角叉菜胶(TypeⅠ)：批号232-524-2，美国SIGMA公司生产。环磷酰胺粉针(CY)：200 mg/瓶，江苏恒瑞医药股份有限公司生产，批号2003041521。盐酸左旋咪唑片：25 mg/片，南京第二制药厂,批5%鸡红细胞悬液的制备：由市售肉鸡采血约10 ml，以肝素生理盐水抗凝，再按1∶1加入注射用0.9% NaCl液(NS)，充分混匀洗涤后，3 000 r/min离心15 min，弃去上清液，余下的红细胞再洗涤2～3次。取洗净离心后的红细胞4 ml，用NS液配制成5%浓度，现配现用。 1.3 仪器S-888型超声波雾化器，中外合资道芬电子有限公司生产；PB303-N千分之一电子天平 上海产；隔水式电热水浴箱；BH-2OLYMPUS显微镜：日本进口。 2 方法 2.1 小鼠止咳实验［1～4］取小鼠50只，称重，随机分为5组，每组10只，♀♂各半，分别为模型对照组（蒸馏水20 ml/kg）、阳性药咳必清对照组(0.05 g/kg)和瘰疬清胶囊大、中、小剂量组(16.0，8.0和4.0 g生药/kg)。各组动物灌胃(ig)给药，给药量均为20 ml/kg，给药1 h后各动物分别置于喷雾箱内，用超声波雾化器以相同强度将浓氨水雾化后喷入活动箱内，喷雾1 5 s后，立即观察动物咳嗽潜伏期（在吸入氨水气雾后至发生咳嗽所需时间为潜伏期），并记录2 min内的咳嗽次数，各给药组与模型对照组进行组间t－检验统计学处理。 2.2 大鼠肉芽肿实验［1～4］肉芽肿模型：大鼠背部中线处取2.0 cm×2.0 cm面积脱毛，消毒，皮下注射2%琼脂(56℃水浴保温)2 ml，注射后立即凸起球状包块即成。隔日取50只肉芽肿模型大鼠，全♂，随机分5组，每组10只，分别为模型对照组(蒸馏水10 ml/kg)、阳性药阿司匹林组(0.1 g/kg)、瘰疬清胶囊大、中、小3个剂量组 (8.0，4.0和2.0 g生药/kg)。各组动物ig给药，给药量均为10 ml/kg。ig 1次/d，连续给药7 d，每日观察肉芽肿变化，末次药后1 h脱椎处死大鼠，剪开肉芽部位皮肤，剥离肉芽肿琼脂块，称取湿重，各给药组与模型对照组进行组间t－检验统计处理。肉芽肿抑制率(%)按下列公式计算： 抑制率（%） =模型对照组均值 - 给药组均值模型对照组均值 ×100% 2.3 大鼠足肿胀实验 ［1～4］取大鼠50只，称重，随机分为5组，每组10只,全♂，分别为模型对照组（蒸馏水10 ml/kg）、阿司匹林组（0.1 g/kg）、瘰疬清胶囊大、中、小3个剂量组(8.0，4.0和2.0 g生药/kg)。给药量均为10 ml/kg。用足跖测定器测量每只大鼠左后肢正常足跖容积（10 ml注射器，上口刻有标记，内含中性洗涤剂的水溶液，通过硬塑料管连接另一5 ml注射器），用记号笔在大鼠左后肢踝关节周围做一标记，将大鼠左后肢浸入容器，使注射器上口标记与大鼠后肢关节标记和液面重叠，多余液体则抽入5 ml注射器内，抽入注射器内的液体量即为足跖容积。测量完给药前的正常足跖容积后，各组动物ig给药，30 min后,于左后肢足跖皮下注入1%角叉菜胶0.1 ml，注射0.5 h后（给药后1 h）按上述方法测量0.5，1，2，4，6，8 h的足跖容积,记录结果，并分别按下式计算肿胀率（%）和抑制率（%）。各给药组与模型对照组进行t－检验统计处理。 肿胀率（%）=致炎后足跖容积－致炎前足跖容积 致炎前足跖容积×100% 抑制率（%） =对照组平均肿胀度 - 给药组平均肿胀度对照组平均肿胀度×100% 2.4 小鼠免疫实验 2.4.1 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验取小鼠60只，随机分为6组，每组10只, ♀♂各半。分别为正常组和环磷酰胺（CY）模型组(蒸馏水20 ml/kg)、阳性药左旋咪唑组(25 mg/kg)、瘰疬清胶囊大、中、小剂量组(16