胆囊癌组织中基因组总甲基化、Bcl-2和P53基因甲基化状态.pdfVIP

中 文 摘 要 胆囊癌组织中基因组总甲基化、Bc l-2 和P53 基因甲基化 状态 摘 要 目的： 胆囊癌是一种相对少见的恶性肿瘤，其发病率与环境因素和遗传 因素均相关。胆囊癌恶性程度较高，预后较差，一般发现时患者已处 于胆囊癌进展期。目前大多数研究的焦点是原癌基因（K-ras ）和肿瘤 抑制基因TSGs （Tumor Suppress Genes ）如（TP53, P16 ,INK4A,和FHIT 基因）。通过全基因组扫描和基因组等位基因分析发现在胆囊中多个等位 基因位点缺失和突变，提示TSGs 参与GBC 的病理生理过程。近来，通 过对 10 个胆囊癌标本的全基因组芯片扫描22 ，000 个转录位点分析发现 一系列在以前未发现的 TSGs 。近年来，有关DNA 甲基化在肿瘤发病中 的作用进行了大量研究，通过DNA 甲基化导致TSGs 表达抑制是肿瘤发 生的主要机制之一。不同类型的肿瘤的其DNA 甲基化改变具有一定的特 异性。在许多病例中，异常的 DNA 甲基化与基因表达下降相关。DNA 通过甲基化是基因缺失和基因突变之后又一表达抑制机制之一。通过数个 临床研究发现，DNA 甲基化在肿瘤早期发现、预防、预后评估和肿瘤肿 瘤治疗中具有重要作用。目前普遍认为胆囊癌与慢性胆囊炎相关，在所 有的胆囊癌标本中均可见到炎症反应。目前有关胆囊癌发生的分子机 制还不清楚，有关DNA 甲基化修饰在胆囊癌发生中的机制还不清楚。 探讨胆囊癌和胆囊炎患者之间基因组 总甲基化水平、Bcl-2 和 p53 基 因的甲基化水平差异。 方法： 通过回顾性性分析收集在内蒙古自治区医院就诊的45 例胆囊癌组 织标本和40 例胆囊炎组织病理学标本。进行患者基线资料采集，其中 包括患者性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤TNM 分期、肿瘤标志物、肿瘤 病理类型和手术方式等情况，提取组织中 DNA 和 RNA ，通过改进的 酶联免疫吸附技术检测 45 例胆囊癌组织和 40 例胆囊炎组织基因组总 甲基化水平，应用甲基化异性PCR 技术检测其 Bcl-2 和p53 基因甲基 化水平，通过荧光定量PCR 检测标本中P53 和Bcl-2 基因的表达。 1 中 文 摘 要 结果： 胆囊癌组织基因组总甲基化水平（4.87±1.1% ）低于胆囊炎组织基 因组总甲基化水平（6.278±0.91% ），p 0.05 ；Bcl-2 基因，45 例GBC 组织中，有8 例发生甲基化（17.7%），40 例CC 组织中6 例发生甲基 化（17%），两者之间无明显差异（p 0.05 ）。p53 基因，45 例 GBC 组织中29 例发生甲基化（64% ），40 例CC 组织7 例发生甲基化（17.5%）， 两者之间差异有统计学意义（p 0.05) 。 GBC 组织Bcl-2 基因mRNA 表达水平为0.66 ±0.16 ，CC 组织Bcl-2 基 因mRNA 表达水平为0.33 ±0.14 ，两者差异无统计学意义（p 0.05 ）。 GBC 组织p53 基因mRNA 表达水平为 0.55 ±0.17 ，CC 组织p53 基因 mRNA 表达水平为0.90 ±0.10 ，两者差异有统计学意义（p 0.05 ）。 结论： 本研究发现，GBC 发生过程中，与CC 相比，基因组总甲基化水平 降低，Bcl-2 基因甲基化状态无明显变化，而P53 基因甲基化水平升高。 基因组低甲基化和 p53 高甲基化可能是胆囊癌发生的分子机制之一。 总之，GBC 的发生受遗传和环境的双重影响，亦有地域差异，表观遗传 学调节方式在其发生中非常重要，由于本研究条件和技术有限，GBC 中有关其它癌基因和抑癌基因的甲基化状态需进一步探讨。 关键词：胆囊癌；DNA 甲基化；基因组；p53；Bcl-2 2