吉林大学实验课件-遗传实验1—有丝分裂课前讲解.pptVIP

Company LOGO 植物有丝分裂的制片与观察 王飞 2012.10 实验目的 掌握植物根尖细胞有丝分裂的制片技术 观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征，找出有丝分裂各个时期的代表性细胞，总结有丝分裂过程中染色体的动态变化。 实验材料及流程 大蒜 2n=16 生根-取材-固定- 解离-漂洗-染色-压片-镜检 1.根冠 2.分生区 3.伸长区? 水培生根（已完成） 取材（已完成） 根尖部位 1.5-2cm 长 固定（已完成） 目的：终止细胞生长过程及一切生理生化反应，维持细胞结构不变 方法：Carnoy固定剂（3份95%乙醇，1份乙酸），处理2-4h 原理：迅速穿透细胞致死，乙醇-脱水收缩 乙酸-膨胀 解离 目的：破坏细胞间果胶质和纤维素，使细胞容易散开 方法：1M HCl 烧杯60℃预热 处理5min 注意：每组统一用纱布取根尖样本，流水漂洗数秒，转移样本到烧杯内并计时 漂洗 目的：去除残留的盐酸，恢复低渗环境 方法：纱布内用蒸馏水或清水漂洗干净，之后在平皿中浸泡待用 剥离分生组织 1 截取3mm左右根尖区域，置于载玻片上 2滤纸吸干多余水分后用解剖针去除半透明状非分生组织，留取白色分生组织 注意：宁滥毋缺 染色 染色液：石碳酸品红（卡宝品红），染色质特异染料 步骤： 1 滴加1-2滴染色液 2 染色5min 压片 单侧慢放盖玻片（领取） 镊子轻敲使细胞分散 如镜检发现细胞分散不完全可重复按压细胞 滤纸吸干多余液体 镜检 10倍或4倍镜锁定目标细胞 40倍镜观察细节并绘图 光栅、光源、镜头洁净度、细胞分散度、使用记录 各个时期细胞实物图及手绘图 前期 间期 中期 后期 末期 前中期 注意事项 操作盐酸和染液时要小心不要接触皮肤，不要溅到实验台或显微镜上 酸解时间不要过长 压片不要用力太猛 显微镜使用规范 实验报告要求 课上完成实验记录（实验步骤，现象），教师签字 课后补充完成全部实验报告（目的，原理，结果，讨论等其他细节） 实验结果的要求：每个时期的细胞图片（照片或手绘） ，各时期特点 讨论部分：针对实验过程细节及个人实验结果自由讨论、禁止抄袭！ 下次课统一由班长上交 Company LOGO