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Company LOGO 果蝇唾液腺染色体制片与观察 王飞 fei@jlu.edu.cn 实验目的 掌握果蝇唾液腺染色体的制片技术 观察唾腺染色体的形态特点 实验材料及流程 果蝇三龄幼虫 melanogaster 2n=8 virilis 2n=12 流程：剥离唾液腺-解离-染色-压片-镜检 解剖幼虫 工具：镊子、解剖针 生理盐水(0.7% NaCl)中操作、保存。注意液体量的控制 解剖幼虫-拉断 唾腺位置：头部两侧、位置在虫体的1/3-1/4 两根解剖针的落点：近头端口器 1/3-1/2处 口器处解剖针平稳前移，身体破裂，一部分器官随口器牵拉而出，另一解剖针向前滚动挤出剩余器官。 解剖幼虫-找到唾液腺 4倍镜下寻找唾液腺（光圈10，淡黄色条状） 对比肉眼观察，锁定唾腺目标，透明条状，倒像 体视镜下唾腺透明度很高不利于寻找 解剖幼虫-剥离唾液腺 体式镜下剥离唾液腺（肉眼辨认也可） 解剖针定期引流，维持湿环境 体视显微镜 * 双物镜 立体视觉 正像 超长焦距 放大倍数连续调节 滤纸吸干液体-换液 一定注意保护样本，不要将其吸到滤纸上 液体较多时滤纸离样本远一点，随着液体减少再逐渐靠近样本 解离-水洗-染色 1M 盐酸 室温解离 8-10 min 用1-2滴生理盐水清洗样本 3次 1-2滴石碳酸品红染色8min（只可4倍镜观察） 压片 盖上盖玻片（避免气泡），保证盖玻片下充满染液。 解剖针轻敲样本正上方使组织细胞分散。 扶住盖玻片边缘，用拇指快速按压样本正上方并维持压力3秒钟，使细胞膜破裂，细胞质流走，染色体散开。 滤纸吸干多余染液 镜检 10倍镜下找到细胞 40倍镜下观察染色体 光圈、光源、镜头洁净度 多线染色体形态 实验报告要求 课上完成实验记录（实验步骤，现象），教师签字 课后补充完成全部实验报告（目的，原理，结果，讨论等其他细节） 实验结果的要求：染色体臂分散的图片（照片或手绘） ，形态特点 讨论部分：针对实验过程细节及个人实验结果自由讨论、禁止抄袭！ 下次课统一由班长上交 Company LOGO
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