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发酵罐问题发现以
绪 论 问题并不可怕,有问题说明还有很多地方,我们没有注意。提示我们加快改变,防止更大的问题出现。 * 以前事故列表 编号 事 故 内 容 解决方法 现象 备注 1 JAR#1 JACKET渗漏 重新焊接 JAR SEED C+ 污染菌二联体球菌 2 JAR温度升高 增加阀门 蒸汽回流 没有冷却水 3 JAR #1 污染 污染 取样口阀门管理 4 JAR #2 污染 更换 污染 FILTER泄露 5 JAR接种之前,PH调高 重新调制 NH3阀门开太大 6 过滤器进水 没关好蒸汽阀门 7 FILTER安装不稳 更换 晃动 可能引起污染 8 培养过程 PH 升高 FLASK接种 PH电极或者控制 9 泡多 泛液 可能导致污染 10 培养基成分加多 培养不正常 11 PH电极没有安装 重新杀菌 责任心不强 12 蒸汽通入培养JAR SPARE 责任心不强 13 内压降为零 可能引起污染 14 菌液移送阀门未关 可能引起污染 * 问题的区分 种母室问题总的可以分为三类: 1.污染类:由于污染菌接触发酵液所致; 2.菌种质量类:没有按照标准操作导致菌种质量受到影响; 3.制度规范类:没有按照制度办事; * 污染类问题发生原因 steam steam steam CW CW steam 另外,JAR有5个直接开口: 1.空气系统;2.取样口系统;3.排气系统;4.上盖系统;5.测量系统 JAR本身的密闭性能:如JACKET、视窗、视镜等 * steam steam steam CW CW steam 在接种和杀菌过程中,不出现问题的话。加上上面所说的完美完成的话,没有污染发生。 * steam steam CW CW JACKET主要用于温度控制,内部流动的介质为动力部门提供的冷却水或者冷冻水。冷却水和冷冻水在动力部门只是通过冷却塔或者冷冻机将自然界中常温水降温到10℃~25℃左右。可以看出其中含有大量的污染细菌。一旦JACKET泄露,污染菌会通过JAR壁进入罐中污染。污染菌为球菌杆菌,颜色发暗; 泄露原因:1)生产厂家制作过程中问题;2)蒸汽反复杀菌并进行冷却导致;3)反复检查操作机械性损伤; 检查方式:1)JACKET通蒸汽升温,通入冷却水,3KG/CM2空气加压,检查有无水珠;2)JAR中加水,JACKET通3KG/CM2空气,检查有无气泡产生; * 视窗视镜是为了在培养过程中观察方便而增加的附属装置。在带来方便的同时也同样带来很多问题。一不小心便会污染。 根据以往经验,由于视窗视镜导致污染很少或者几乎没有,但是需要注意以下事情: 1)材质为钢化玻璃,不要骤冷骤热; 2)安装要平衡用力,否则可能受力不均匀而折断; 3)时常检查螺帽有无松动,防止泄露; * steam steam 空气系统问题产生原因分析: 1)浑浊气体没有过滤充分:过滤器本身问题、安装问题、杀菌问题; 2)空气过滤充分以后再次污染:设备(管道、法兰、阀门)本身问题、操作失误、外部非人为因素变动情况; 3)NH3管理不善; 4)清洗以及杀菌; * 排气系统问题产生原因分析: 1)外部气体进入; 2)由于发酵液回流将污染菌带入; 3)管道本身存在泄露; 4)清洗以及杀菌; 5)操作失误; * 取样口系统问题产生原因分析: 1)操作失误; 2)阀门、管道等设备本身问题; 3)移送管道问题; 4)移送问题; 5)移送管道杀菌问题 * 由于上盖而产生的问题好象几乎没有,个人认为出现问题时,比较隐蔽。即使有问题发生也很少注意到是由于上盖的密封性能、操作失误等原因引起的。 上盖产生问题原因分析: 1)本身问题:0-RING、垫片问题; 2)杀菌不充分,与发酵液接触; * 测量系统包含:PH电极、DO电极以及预留口(盲塞)等等;由于结构比较复杂,又于发酵液直接接触,在安装杀菌日常维护等过程中应当特别小心。防止出现问题。 PH电极、DO电极通过0-RING与螺帽与JAR连接在一起。他们的状态直接关系到污染:因此注意检查,保持本身的清洁。注意对其进行维护防止在培养过程中因功能失效从而导致培养失败。 * 菌种质量类问题 菌种在培养过程中受到培养基成分、培养条件、条件控制等方面的影响。假若影响不十分剧烈,外观无法判断。因此只能从开始源头捉起,防止此类事故发生。 * 1)培养基: 培养基成分是菌种生存的基础。在好的培养基中菌种才能正常生长,从而提高产品的质量和数量。 ①调制培养基的过程中注意成分的分子式、含量,防止多加、少加、漏加、错加。 ②溶液长时间的放置会出现沉淀,添加之前注意溶解。 ③MIX由于对于热不稳定,在调制或者溶解的过程中防止成分破
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