发酵条件优化及基因簇加倍对厦门霉素生物合成的影响.PDFVIP

微生物学通报 Mar. 20, 2017, 44(3): 680?688 Microbiology China /wswxtbcn tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.160207 研究报告 发酵条件优化及基因簇加倍对厦门霉素生物合成的影响 胡晓艳 1 徐岷涓 2 步绪亮 1 徐俊 1,3* (1. 上海交通大学生命科学技术学院 微生物代谢国家重点实验室 上海 200240) (2. 上海交通大学系统生物医学研究院 上海 200240) (3. 上海交通大学海洋研究院 上海 200240) 摘 要：【目的】优化发酵培养条件及加倍 xim 基因簇，提高厦门霉素的产量。【方法】采用单 因素添加：C 源(鼠李糖、葡萄糖酸)、无机 N 源(KNO3)、稀有金属元素(ScCl3)及 A-Factor (γ- 丁内酯)，优化适宜厦门链霉菌 318 菌株产生厦门霉素的培养条件；通过位点特异性整合将厦 门霉素生物合成基因簇进行加倍，构建高产的基因工程菌株厦门链霉菌 318Pls1，并对其培养 基进行了正交实验优化。【结果】与初产量(15 mg/L)相比，在 GYM 培养基中进行单因素添加 可使 318 菌株的厦门霉素产量达到 20 mg/L；而基因簇加倍菌株 318Pls1 在 GYM 培养基上的厦门霉 素产量可达 35 mg/L，在正交实验优化后的 9#培养基中厦门霉素产量可达 76.15 mg/L。【结论】对 厦门霉素的发酵培养条件进行了优化，并通过基因簇过表达获得了生物合成能力提高的菌株， 为进一步提高其产量奠定了基础。 关键词：厦门霉素，生物合成，培养条件优化，基因簇加倍 Medium optimization and biosynthetic gene cluster doubling enhance xiamenmycin yield HU Xiao-Yan1 XU Min-Juan2 BU Xu-Liang1 XU Jun1,3* (1. State Key Laboratory of Microbial Metabolism, School of Life Sciences Biotechnology, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China) (2. Shanghai Center for Systems Biomedicine, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China) (3. Institute of Oceanology, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China) Abstract: [Objective] To improve xiamenmycin yield from Streptomyces xiamenensis 318 we optimized fermentation medium and doubled biosynthetic gene cluster. [