虾过敏原Pena1抗原表位的关键氨基酸分析.pdfVIP

第 ??卷? 分 析化学 ?????????????? 研究报告? 第 ??期? ????年 ??月? ??????????????????????????????????????? ????～????? ???· ??．?????／?．????．?????????．??????? 虾过 敏 原 ??????抗原 表位 的关 键氨 基 酸分 析? 牟 慧? 高美须? 李淑荣? 王志东? 潘家荣? 赵 杰? 支玉香? 李树锦? 赵 鑫? ?农业部农 产品加工 重点实验 室／中国农业科学 院农产 品加工研究所 ，北京 ???????? ?北 京农 业职业学院 ，北京 ???????? ?中 国计量学院生命科学院 ，杭 州 ??????? ?北京协 和医院变态 反应科 ，北京 ???????? 摘 要 建立 了一种利用表位抗体筛选虾过敏原 ??????抗原表位 中关键氨基酸 的方法 。利用 生物信息学软? 件 ?????计算 ??????中表位的氨基酸组成和出现频率 ，并采用 ??????软件 对 ????数 据库 中致 敏食 物原? 肌球蛋 白的氨基酸保守性分析 ，综合两种方法筛选出各表位可能 的关键氨基酸 ，?????????：?，?，?；?????????：? ?，?，?；?????????：?，?，?，?，?；?????????：?，?，?。用丙氨酸取代并合成 突变 多肽 。利用表位抗体 ，通过? 竞 争性 免疫 斑点法及 间接 ?????方法检测 突变多肽的抗体结合 能力 ，筛选 出各 表位的关键 氨基酸 。分别 为 ：? ????????：谷氨酰胺 ；????????：亮氨 酸和谷氨酸 ；????????：亮 氨酸和天冬 氨酸 ；????????：亮氨酸 。实验结 果证 明? 了此种 筛选关键 氨基 酸的方法 的可行性 ，为 ??????致敏 机理 的研 究及利 用基 因修饰脱敏 提供 了一定 的理论? 依 据。? 关键词 ??????；抗原表位 ；突变 多肽 ；关键氨基酸? ?? 引? 言? 虾蟹 和鱼类因其味道鲜美 ，营养丰富 ，被广大 民众所喜爱。但是虾类隶属于 国际粮农组织 ?????? 公布的八大类食物过敏原中的甲壳类过敏原??，虾过敏 问题一直 以来 广受关注。研究表 明，虾中主要? 过敏原是 ??????，分子量 ??????，是一种原肌球蛋 白??。在食物过敏中，过敏原 中的抗原表位 即抗原决? 定簇起重要作用?’???。????年 ，?????等? 利用交叠肽合成法 ，用患者 的过敏血清鉴定出 ??????中有? ?个 ???结合区，共 ?个线性抗原表位 ，见表 ?。表位主要由 ?～??个氨基酸组成 ，其 中每个氨基酸在表? 位中所起的作用均不 同。有些氨基酸残基在表位中起关键作用 ，这些特定氨基酸