生物与分子生物学复习 2014复习要点II.docVIP

生物与分子生物学（II）复习要点 DNA的复制和修复 DNA复制的特点： 1．半保留复制 2．有一定的复制起始点 3．需要引物(primer) 4．双向复制 5．半不连续复制、冈崎片段 重点：原核生物DNA的复制过程（起始、延伸、终止）；起始位点结构特点（三13 bp，四9 bp共有序列），E.coli 5种 DNA聚合酶 （聚合酶I、klenow片段，聚合酶III亚基组成、功能）的特点; 蛋白因子（SSB，Dna等），DNA连接酶（两种）的作用，引物酶、拓扑异构酶（解螺旋、旋转酶）、端粒与端粒酶；复制调节（甲基化） 真核生物DNA聚合酶种类（?、?、?、?、?）、主要功能 DNA损伤修复的几种方式（错配修复、直接修复、切除修复、重组修复、易错修复）；SOS反应 （LexA阻遏物和RecA蛋白作用） 无意/错意突变，点突变：转换与颠换，突变与诱变剂；常见突变类型与常见诱变剂种类。 DNA的重组 重点：重组类型：同源重组、 位点专一性重组、 转座重组），Holliday模型，细菌的基因转移主要有四种机制（接合、转化、转导、细胞融合）， DNA单链的同化、λ噬菌体的整合与切除、免疫球蛋白多样性原因，何谓转座子、转座的遗传效应。 RNA的生物合成和加工 一、RNA转录合成的条件： 1．底物2．模板（关于模板链/正负链/有意义无意义链） 3．原核生物RNA聚合酶（大肠杆菌RNA聚合酶亚基组成、特点） 真核生物中的RNA聚合酶分为三种： RNA polⅠ，对α-鹅膏蕈碱不敏感，用于合成rRNA前体； RNA polⅡ，对α-鹅膏蕈碱极敏感，用于合成hnRNA；RNA polⅢ对α-鹅膏蕈碱中度敏感，用于合成tRNA前体、snRNA及5S rRNA。 二、RNA转录合成的基本过程： 1. 启动子： -10， -35区 转录过程： 1）识别：（原核生物）RNA聚合酶中的σ因子识别转录起始点，并促使核心酶结合形成全酶复合物。 2) 起始：A，G 3）延长：σ因子从全酶上脱离，余下的核心酶继续沿DNA链移动，按照碱基互补原则，不断聚合RNA 4）终止：RNA转录合成的终止机制有两种。 ⑴自动终止：模板DNA链在接近转录终止点处存在相连的富含GC和AT的区域，使RNA转录产物形成寡聚U及发夹形的二级结构，引起RNA聚合酶变构及移动停止，导致RNA转录的终止。 ⑵依赖辅助因子的终止：由终止因子（ρ蛋白）识别特异的终止信号，并促使RNA的释放。 三、真核生物RNA转录后的加工修饰： 1．mRNA的转录后加工：  ⑴加帽:CAPO型--m7Gppp; CAPI型--N1核苷酸 2’-OH甲基化; CAPII型-- N2核苷酸2’-OH也被甲基化; ⑵加尾 ⑶剪接： 真核生物hnRNA的剪接一般需snRNA参与构成的核蛋白体参加（GT-AT规则） ⑷内部甲基化2．tRNA的转录后加工： 主要加工方式是切断和碱基修饰。 3．rRNA的转录后加工： 主要加工方式是切断。 四．RNA的拼接（选择性/反式拼接）、编辑和再编码，生物学意义,校正tRNA. 五．RNA指导下的RNA和DNA的合成 病毒RNA复制的主要方式 逆转录酶的概念和特点 逆转座子的概念 蛋白质的生物合成及转运 重点：遗传密码，数量，起始、中止密码，密码的简并性，变偶性，与反密码子配对原则。原核生物蛋白质合成过程（具体），起始氨酰-tRNA（原核、真核）,P/A位，SD序列，能量消耗部位、计算，常见合成抑制剂（真核、原核），蛋白质翻译后修饰、加工及运输特点，信号肽与信号肽识别体。 激素与细胞信号 重点：激素作用的一般特征（特异性 高效性、微量、需要受体），个别激素如：甲状腺素合成特点、作用，肾上腺素作用，胰岛素和胰高血糖素的作用，第二信使概念（Ca2+、DAG、IP3、cAMP、cGMP），受体的特点，G蛋白与G蛋白偶联受体特点，霍乱毒素与百日咳毒素作用，cAMP - 蛋白激酶Ａ途径、Ca2+及肌醇三磷酸-蛋白激酶C途径、酪氨酸蛋白激酶受体型特点，胞内受体特点，NO的作用及信号途径。 基因表达调控 重点：基因表达调控的中的重要概念，操纵子、乳糖操纵子，CAP（CRP）的正性调节，衰减子及工作原理，严谨型控制、魔斑及作用，反义RNA对翻译的调节，顺式作用因子，反式作用因子(常见DNA结构域类型)。 原核与真核基因表达调控特点比较。 基因工程及蛋白质工程 重点：基因工程及蛋白质工程概念，工具酶种类，载体应具备的条件，常见载体类型（质粒载体、噬菌体载体、黏粒），表达载体特点，基因克隆的基本程序、目的基因的制备方法、常用遗传转化方法、常用重组体的筛选和鉴定方法原理，真核基因在E.coli中可以表达类型:融合蛋白、非融合蛋白或分泌型表达。定点诱变及其方法，定向