银纳米粒子的影响在老鼠胚胎干细胞自我更新和增殖.docVIP

纳米银老鼠胚胎干细胞自我更新和增殖的影响关键词:银纳米颗粒(AgNPs)鼠标胚胎干细胞(制)自我更新和扩散Nanotoxi独特的抗菌性能纳米银颗粒(AgNPs)常用的医学和商业产品得到迅速普及AgNPs对干细胞自我更新和增殖的影响的分子机尚。工作的目的是小鼠胚胎干细胞作为细胞模型来AgNPs的毒性。胚胎干细胞是一个非常特殊的细胞类型具有自我更新和分。这个的目的是确定AgNPs与不同表面化学成分小鼠胚胎干细胞自我更新和细胞周期的影响。AgNPs两种不同表面化学成分包被和烃包被用来他们对小鼠胚胎干细胞自我的毒性作用。结果表明,两种多糖包被和烃包被 AgNPs都能改变小鼠胚胎干细胞细胞形态。细胞周期分析表示AgNPs通过抑制的视网膜母细胞瘤(Rb)的蛋白质细胞周期阻滞在G1和S。此外,AgNPs减少Oct4A同种型表达小鼠胚胎干细胞的多能性负责此外, AgNPs与两种不同表面化学成分的产生(ROS)支持我们的假设, AgNPs毒性暴露是由于改变了基因表达和蛋白质的修改ROS过度的。多糖涂层减少活性氧的生产,从而降低了AgNPs毒性介绍纳米技术是一个在医学和常用的生产产品快速增使用的领域 [1 - 3]。在数百种产品纳米材料AgNPs是使用最广泛的。AgNPs独特的抗菌性能通常用于医学和商业在医学伤口敷料、手术器械和医疗口罩减少微生物种群[4 - 6]。他们也湿器和水净化使用[7]。由于他们的小高表面积AgNPs具有很高的化学活性,并产生大量活性氧(ROS)[8]。活性氧和自由基产生导致氧化应激,炎症、DNA和膜损伤。成纤维细胞研究表明AgNPs可以进入人类, 初级神经细胞和皮肤癌细胞诱导活性氧和细胞死亡导致氧化应激(9 - 12)和DNA损害。另一项研究表明, AgNPs通过上调p53凋亡通路诱导细胞死亡 [13]。AgNPs增加引起的p53的表达, p53是一个,p21,病因, ,蛋白质和DNA损伤修复Rad 51和H2AX(11、14、6、15)。这个的目的是确定的AgNPs有和没有涂层小鼠胚胎干细胞自我更新和细胞周期。AgNPs常见是应用多糖包被涂层/稳定剂。它已经表明,涂层将影响颗粒的形状、大小和表面性质AgNPs毒性[16]。很多研究显示纳米颗粒入的人类体细胞和非哺乳类细胞比如斑马鱼与毒性。然而,小的工作涉及AgNPs对胚干细胞的影响[17]。胚胎干细胞(ESCs)克隆细胞系来源于内细胞群发展胚泡(18、19) 胚胎干细胞是早期胚胎（原肠胚期之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。。他们可以在体外无限增殖能力也分化成细胞三个胚芽层(内胚层、中胚层和外胚层),因此胚胎干细胞是一个工程纳米颗粒潜在的毒性的细胞模型(19、20)。我们的长期目标的研究了解AgNPs小鼠胚胎干细胞自我更新和有毒影响和发展一个干细胞测试(EST)作为工具根据其毒性的潜力设计纳米颗粒(NPs) 分类。我们假设AgNPs后生产过剩的活性氧可以诱导氧化应激,导致改变关键调节基因表达和蛋白质,从而抑制细胞更新和细胞。进一步的,适当的AgNPs活性氧的生产可以减少毒性。ESCs自我更新属性和是由几个的相互作用网络转录因子包括Oct4和Nanog。Oct4是ES中找到。OCT4基因可变剪接可以产生至少两(OCT4A OCT4B)由 (21、22)。OCT4A是最常见的,被翻译成一个完整的OCT4蛋白质POU dna结合域隔开N – C末端域。胚胎干细胞。相比之下, Oct4B外显。因为Oct4B不能维持胚胎干细胞自我更新它可能是负责细胞。通过内部网站翻译的替代办法信使rna[23]。然而,Oct4B的功能以及它替代翻译监管尚不清楚。我们的研究结果提供了证据支持Oct4B的功能干细胞应激反应。如果细胞是有,控制系统将关闭细胞周期。。。如果Rb或不含磷的仍然附着在E2F转录因,导致细胞周期阻滞。研究AgNPs的蛋白质更好的理解的分子机制并提供的生物标志物分析。2 材料和方法2.1 银纳米颗粒的表征(AgNPs)本研究中使用的两种类型的AgNPs在他们的表面化学成分。。。。。。。[25]。结果显示AgNPs的大小多数5.0和20 nm之间(补充图1 a和b)。。2.2。制细胞培养和AgNPs治疗J11细胞彼得Stambrook博士的礼物(辛辛那提大学医学院)。。。2.3 活性氧(ROS)测定处理和未经处理5 μM CellROX深红试剂在小鼠胚胎干细胞的细胞培养基中，黑暗条件下、37℃和10％CO 2的温育30分钟，并在PBS（pH 7.2-7.6）中洗涤3次。 CellROX Deep Red Reagent是一种细胞永久染料，吸收/发射最大值为644?665 nm。图像是用包括Fluoview图像采集和分析