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关于利巴韦林片含量测定方法改进分析 【摘要】利巴韦林片属广谱抗病毒药。适用于呼吸道合并病毒引起的病毒性肺炎与支气管炎,皮肤疱疹病毒感染。常见的不良反应有贫血、乏力等,停药后即消失。较少见的不良反应有疲倦、头痛、失眠、食欲减退、恶心、呕吐、轻度腹泻、便秘等,并可致红细胞、白细胞及血红蛋白下降。 【关键词】紫外分光光度法;高效液相色谱法;利巴韦林片 doi:10.3969/j.issn.1004-7484(x).2013.07.725文章编号:1004-7484(2013)-07-4101-02 1资料与方法 1.1试验器材在此次试验中我们选择的实验器材是紫外分光光度仪,型号为MV-160IPC;高效液相色谱仪,型号为SP8800;电子天平,型号为AG245;用来测算时间及峰值的积分仪,型号为SP4400以及用来测试色谱柱状态变化的检测器,型号为SP100MV。本次试验我们所选取的药品是:利巴韦林片,烧碱,以及水。其中利巴韦林片要选择两种,分别用于试验与参照,烧碱的纯度要达到化学试剂二级纯度的标准,水的纯度也要达到超高的标准。 1.2试验方法 1.2.1紫外分光光度法 1.2.1.1测定波长的确定①用于试验的利巴韦林溶液的配制:从试验组里拿出二十片药物,并磨成细粉状,用电子天平量出其中的五十毫克,这里要注意精准度的把握,然后放进已准备好的带有刻度的容器当中。之后选择浓度为每升0.01mol的烧碱,缓缓倒入装有利巴韦林粉末的容器中,直至溶液到达50毫升刻度线处。最后将二者在容器内充分混合,得到试验所需的利巴韦林试验溶液,这时候的溶液浓度为每升1mg。②用于参照的利巴韦林溶液的配制:这里需要提到的是参照组的利巴韦林片是经过高温烘干,处于恒重状态的。将参照组的利巴韦林片磨成粉末状,用电子天平量出其中的五十毫克,这里要注意精准度的把握,然后放进已准备好的带有刻度的容器当中。之后选择同样浓度的烧碱,采取同样的凡是倒入容器并将二者在容器内充分混合,从而得到我们参照所用的利巴韦林试验溶液,这时候的溶液浓度同样为每升1mg。③从试验组和参照组中依次取出1毫升,放置在两个容量为50毫升同等大小的带有刻度的容器中,之后选择浓度为每升0.01mol的烧碱溶液依次倒进到两个容器当中,直至溶液到达50毫升刻度线处。最后依次摇晃容器,使二者均与烧碱溶液充分混合,这时的溶液浓度为每毫升20μg。将浓度为每升0.01mol的烧碱溶液作为空白,将测定区域限定在200nm到400nm之间,通过分光光度仪的,测算波长,并最终将波长测定为214nm。 1.2.1.2标准曲线的制备依次从参照组中量取利巴韦林对溶液,第一次为0.1毫升,第二次为0.25毫升,之后每次增加0.25毫升,共取六次。将这六份利巴韦林溶液放进标有刻度的容器当中,然后选择浓度为每升0.01mol的烧碱溶液,依次倒入装有不同浓度利巴韦林溶液的容器中,直至溶液到达50毫升刻度处。最后依次摇晃容器,使两种溶液充分混合,得道不同浓度的混合溶液,浓度依次为每毫升2μg、每毫升5μg、每毫升10μg、每毫升15μg、每毫升20μg以及每毫升25μg。将浓度为每升0.01mol的烧碱溶液最为空白,根据上一步我们所测定出的波长,在214nm的地方,利用测量仪依次测试出溶液的吸收度,设为A值,得出A与浓度C的方程式:A=0.042C+0.078,r=0.9998(n=6)。通过试验得出当溶液浓度处于每毫升2μg到25μg之间的时候,溶液浓度和吸收度之间表现出较好的线性关系。 1.2.1.3试验品含量测定用电子天平量出一部分利巴韦林粉末,这里要注意精准度的把握,然后放进已准备好的带有刻度的容器当中。假如蒸馏水摇匀,得到浓度为每毫升1mg的溶液,依次量取10μl进行测试,采取外标法来算出标示量。加样回收率测定:量出50毫克左右的利巴韦林粉末放入到带有刻度的容器中,分别从参照组中量取40毫克、50毫克以及60毫克的利巴韦林粉末,每一样都是三份,将浓度为每升0.01mol的烧碱溶液缓缓带入到容器中,直至溶液到达50毫升刻度处。从不同浓度的混合溶液中依次取出1毫升,倒入到带有刻度的容器当中,将浓度为每升0.01mol的烧碱溶液缓缓带,直至溶液到达50毫升刻度处,晃动容器使溶液充分混合,采取含量测定的办法来完成加样回收率的测定工作。稳定性试验:依次从参照组中量取不同浓度的利巴韦林溶液,依次放到常温中0小时、8小时以及24小时,在波长214nm的地方测量到吸收度,设为A值,通过实验我们能够看出溶液的稳定性良好。 1.2.2高效液相色谱法测定波长的选择:①参照品溶液的制备:精密称取利巴韦林50mg置于50ml量瓶中。加流动相适量,超声振荡溶解,放冷,加流动相溶解
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