第12章气相色谱法概念.ppt

所谓归一化法就是以样品中被测组分经校正过的峰面积（或峰高）占样品中各组分经校正过的峰面积（或峰高）的总和的比例来表示样品中各组分含量的定量方法。 条件：当试样中所有组分均能流出色谱柱，且完全分离，并在检测器上都能产生信号时，可用归一化法计算组分含量。 请简单设计用归一化法测定丁醇异构体混合物中各组分的含量的实验方案。 1. 归一化法 定量计算方法 丁醇异构混合物的分离谱图 0.58min—叔丁醇；1.30min—仲丁醇； 1.99min—异丁醇；3.01min—正丁醇。 归一化法计算公式 请写出用归一化法测定丁醇异构体混合物中各组分的含量的计算公式。 归一化法的计算 优点：简便、精确，进样量的多少与测定结果无关，操作条件（如流速，柱温）的变化对定量结果的影响较小。 缺点：校正因子的测定较为麻烦。同系物或同分异构体的计算可简化为 主成份分析：工厂出厂的产品，其主成份的含量往往大于99%，直接使用简化的归一化法计算公式进行计算 。 采用积分仪或色谱工作站处理数据时，一般均采用峰面积直接归一化进行定量分析。 归一化法小结 2. 内标法 若试样中所有组分不能全部出峰，此时能否采用归一化法进行定量分析？为什么？ 若分析测试时其要求是测定试样中某个或某几个组分的含量时，此时是否一定要用归一化法进行定量分析？为什么？ 提示：试样中所有组分不能全部出峰，此时肯定不能用归一化法 进行定量分析。 提示：若只需测定样品中的几个组分的含量时，不一定要用归一化法进行定量分析。 下面给大家介绍一种新的定量方法――内标法，学习时注意区别这两种定量方法的区别。 内标法的概念与计算 所谓内标法就是将一定量选定的标准物（称内标物S）加入到一定量试样中，混合均匀后，在一定操作条件下注入色谱仪进行分析，出峰后分别测量组分i和内标物S的峰面积（或峰高），按一定的计 算公式计算组分i的含量。 内标法的计算公式 Ai、AS分别为组分 i 和内标物 S 的峰面积 分别为组分 i 和内标物 S 的质量校正因子 内标物的选择 内标物应是试样中不存在的纯物质； 内标物的性质应与待测组分性质相近，以使内标物的色谱峰与待测组分色谱峰靠近并与之完全分离； 内标物与样品应完全互溶，但不能发生化学反应； 内标物加入量应接近待测组分含量。 进样量的变化、色谱条件的微小变化对内标法定量结果的影响不大； 在样品前处理前加入内标物，再进行前处理时，可部分补偿欲测组分在样品前处理时的损失； 若要获得很高精度的结果时，可以加入数种内标物； 内标法定量比标准曲线法定量的准确度和精密度都要好； 选择合适的内标物比较困难，内标物的称量要准确，操作较复杂； 若试样中所有组分不能全部出峰，或只要求测定试样中某个或某几个组分的含量时，可以采用内标法定量。 内标法的特点 内标法应用实例：甲苯试剂纯度的测定 标准溶液和试样溶液的配制 标准溶液的配制 甲苯试样溶液的配制 仪器开机、点火、调试； 标准溶液的分析 相对校正因子的计算： 甲苯试样溶液的分析 甲苯试样中甲苯含量的计算： 相对校正因子的测定 甲苯试样中甲苯含量的测定 内标法的问题与讨论 答：没有。由测定过程和计算公式我们可以发现，进样量的大小不影响最终的测定结果。 对内标法而言，能否用待测组分本身标准物做内标物？为什么？ 要点：能，此即为标准加入法 答：主要原因是标样与试样称量的准确性与进样技术。 答：其中一种解题思路是由计算公式反推。 问题：使用内标法进行定量分析时，如果测定结果不准确，你认为原因会是什么？说出你的分析思路和解题思路。 问题：内标法对进样量有无严格要求？为什么？ 3. 外标法 外标法又称标准曲线法 在一定操作条件下，用对照品配成不同浓度的对照液，定量进样，用峰面积或峰高对对照品的量（或浓度）作校正曲线，求出斜率、截距，而后计算样品的含量。若校正曲线线性好，截距近似为零，可用外标一点法（比较法）定量。 外标一点法： 用一种浓度的 i 组分的标准溶液，进样一次，或同样体积进样多次，取峰面积平均值，样品溶液在相同条件下进样，测得峰面积，用下式计算含量： i 组分的质量 i 组分的峰面积 i 组分对照液的质量 i 组分对照液的峰面积 方法优点： 操作计算简便，不必用校正因子，不必加内标物，常用于日常分析。 方法缺点： 1）色谱条件（检测器的响应、柱温、流动相的流速（特别是对于气相色谱）、进样量、柱效等）对方法准确度影响极大。 2）进样量要求准确。 12.7 应用与示例 气相色谱法在药物分析中的应用很广泛，包括药物的含量测定、杂质检查及微量水分、残留溶媒测定、药物中间体的监控(反应程