MX的遗传毒性对ras基因作用的研究.pdf

兰!翌苎查．羔竺堡墨!苎——————————兰翌三苎_苎兰!兰!蔓生 MX的遗传毒性及对ra$基因作用的研究 吴建军 指导老颊：鲁文瀵 摘要 MX，鞠3．鬣．霹．二氯甲基-5．羟基-2(5氢)-呋喃黼 纯消毒豹戮产耪，盘天然承串笳瘸薅酸与氯反应生成。f1986年，芬 兰入Hemming等蓠次歇筑纯演毒静饮水串检斑Mx，继之，美罾、 英国、墨本_稂中国等樱继苁蒹纯港毒静饮水中检＆MX。尽管MX在 饮零中豹浓发缀低，一般为5—67ng／L，但鼠伤寒沙门氏萤溷复突燹 试验(Ames试验)显示MX是～秘摄强豹袁接诱变潮。其掰导致浆 诱变性占了氯化消毒饮农鸯娥提壤掳总诱燮性灼15-s7％，建遮戒氯 化消毒饮水致突变性的主要成分。豫能诱导细壤麴突变外，Mx还霹 引起哺乳动物纲胞遗传物质发生碱基突变、DNA损伤、染色体疃变 (CAs)、姊妹染色体交换(SCEs)等多种遗传毒性损害，并W引起实验大鼠 多个腕器的肿瘤涠于我豳目前仍广泛采用饮水氯化消毒方法，短期 内还不可能为其它方法所替代，因而贺；鼠Mx对健康影响的磺究对我 一 国正确评价氯化消毒饮水的安全能具有熏要的现实意义。 f尽管到目前为止，大多数的研究都表明了Mx具有从原核生物列 哺乳动物细胞的致突交性以及体内试验的致癌性，但其对人类细胞的 遗传毒性作用报道麓少，对MX的致突变和致癌机理也是不清楚的oA-： 本实验以入类来源的肝细胞株(人肝肿瘤细胞HepG2和人胎肝细胞 Gel Cell L．02)为靶细胞，采用单细胞凝胶电泳技术(Single 缁脆轻L-02细施DNA的损伤作用和损伤特性，以阐明MX对人类 维施的遗传霉栏作用。隅外，靛Mx对动物的致癌试验中可觅，甲状 腺、野魅、是MX致癌静主要靶器官，稀ras基霜的突变和过度表遮 与这些脏器辨瘩抟发生_葶瑟发展密甥穗关。因就本试验采溺HepG2和 L—02缨怼体外染毒的方法，运瑶暇整杂交技术秘WesternBlot技术磷 ±±苎苎查兰竺兰墨．兰苎————型翌三苎!兰兰兰兰! ras蛋白表达的影响，拟从一个侧面探讨 究MX对ras癌基因和P21 MX的致突变和致癌机理，为正确评价MX对哺乳动物和人类的致癌 危险度提供依据。 本研究由二部分组成 第一部分：饮水氯化消毒副产物．MX对人类来源的肝细胞株DNA 的损伤作用和损伤特性。 ／运用单细胞凝胶电泳技术，采用MX体外染毒的方法，研究MX DNA迁移度呈剂量依赖性增加， 作用。结果发现：MX可引起HopG2 与溶剂对照(DMSO)相比，30la mol／L及以上浓度的MX引起的HepG2 la DNA迁移度的影响在100mol／L及以上浓度时表现出明显增加，与 级结果显示：MX(300la DNA的损伤分 mol／L)对HepG2和L一02 级为：中度以上损伤分别达50．7％、20％，重度以上分别达23．7％、 DNA的损伤分级为：中 5％：MX(100弘mol／L)对HepG2和L一02 度以上损伤分别达27．5％、12％，重度以上分别达7．8％、3％；MX(30 IJ 为l DNA的损伤分级为：中度以上损伤分别 mol／L)对HepG2和L一02 达94％、68％，重度以上分别达86．7％、30％。试验结果表明饮水氯 化消毒副产物一MX对人类来源的肝肿瘤细胞HepG2和人胎肝细胞L 一02的DNA均有明显的损伤作用，而且对比两细胞株发现，HepG2 遗传毒理学评价的一个理想的细胞株。J肛^＼； 第二部分：饮水氯化消毒副产物一M