1，2，4-三苯对小鼠抗氧化系统的影响.pdf

中文摘要 前 言 (1，2，4一三氯苯(1，2，4—rcB)在自然环境和工业生产中广泛 存在，它在自然环境中长期存留和富集会产生一系列环境问题。 美国国家环保局(EPA)已将其列入环境污染物清单。 国内外许多学者对1，2，4—TCB的毒性已经作了大量研究， 随着活性氧自由基与疾病研究的进展，揭示出自由基与多种毒物 损伤存在着密切关系。自由基在体内产生，可发生脂质过氧化，破 坏细胞膜的生物功能，造成机体损伤。亍本研究通过测定急性不同 剂量染毒对小鼠全血、心、脑、肝脏和肾脏的氧化损伤，并观察亚急 性不同剂量染毒引起的各脏器病理改变，为制订我国1，2，4—TcB 的卫生标准提供参考。 俯料与方法 1． 实验动物分组及染毒 1．1实验用小鼠40只，雌雄各半，体重25±3克，随机分成4 组，每组10只，1个对照组，3个实验组，染毒方式为皮下注射，对 照组注射生理盐水，实验组给药剂量分别为1382．2mg／kg、27“． 取血，断髓处死小鼠后解剖取出心、脑、肝脏和肾脏，生理盐水冲 洗、滤纸滤干后冰冻保存。 1．2实验用小鼠16只，随机分成4组，每组4只，1个对照 组，3个实验组，给实验组皮下注射1，2，4—代B，剂量分别为 ·1· 水，染毒4次，间隔4天，第4次染毒后24小时断髓处死动物，解 剖取肝脏和肾脏皮质，制成光镜和电镜病理切片。 2． 观察指标与检测方法 2．1各组织测定前准确称重并制作组织匀浆，血清和组织中 LPO的测定用硫代巴比妥酸(TBA)法，全血和组织中超氧化物歧 化酶(SOD)活力的测定用亚硝酸盐(Nitrite—ra)法、谷胱甘肽过 氧化物酶(GSH—Px)活力的测定用二硫双硝基苯甲酸(DTNB) 法、总巯基(T—SH)和非蛋白巯基(NP—SH)含量的测定用Ell一 ／nan’s法。血红蛋白含量的测定用氰化高铁血红蛋白法，组织蛋 白的测定用双缩脲法。 2．2光镜：常规的10％福尔马林固定、石蜡包埋、HE染色； 电镜：2．5％戊二醛初固定，1％的锇酸后固定，双重染色。用光镜 和透射电镜观察组织和细胞内部结构的变化，比较实验组和对照 组的组织病理变化。 实验结果 1． 测定 小鼠皮下注射1，2，4—TcB24小时后，脑低、中、高三个剂量 组和肝脏中、高剂量组的LPO含量显著高于对照组。同时，脑低、 中、高三个剂量组的SOD活力、NP—SH含量以及低剂量组T—SH 和PB—SH含量、高剂量组GSH—Px活力与对照组相比均有显著 性差异；肝脏中、高剂量组NP—SH含量和GSH—Px活力与对照 组相比明显降低，而高剂量组SOD活力与对照组相比却显著增 高；肾脏低、中、高三个剂量组的GSH—Px活力以及低剂量组的 NP—SH含量与对照组相比明显降低。全血低、中、高三个剂量组 的GSH—Px活力与对照组相比显著降低，但中剂量组的T—SH ·2· 和PB—sH含量却显著升高。表明1，2，4—TcB进入体内后血液 和组织中脂质过氧化作用增强，相应地引起血液和组织中抗氧化 酶类的变化。 2． 组织病理形态学观察 (1)光镜结果 肝脏：对照组肝细胞胞浆均匀，无空泡，偶见轻度水样变；低剂 量组肝细胞轻度水样变，汇管区有淋巴细胞、白细胞浸润和血管扩 张充血；中剂量组肝细胞水样变，有点状坏死、再生及间质炎细胞 浸润、肝窦及小血管扩张充血；高剂量组肝细胞水样变性明显，肝 窦及小血管扩张充血，可见点、灶状及桥接坏死，肝细胞再生及汇 管区炎细胞浸润。 肾脏：对照组肾小球、小管结构正常，小管上皮轻度水样变；低 剂量组小管上皮轻度水样变，肾间质血管充血；中剂量组小管上皮 细胞水样变性，小球毛细血管丛及间质血管充血；高剂量组小管上 皮中度水样变性，小球毛细血管丛、间质血管扩张充血，肾小管管 腔内有蛋白渗出，间质炎细胞浸润。 光镜下实验组与对照组比较损伤程度有明显差异，并随1，2， 4—TCB浓度增高损伤程度加重，但无性别差异。 (2)电镜结果 肝脏：对照组胞浆可见丰富的线粒体、内质网，未见异常改变。 损伤组：线粒体肿胀，嵴变短进而消失，内质网扩张，呈空泡状。