非淀粉多糖类酶制剂评价方法存在的问题及对策.pdfVIP

非淀粉多糖类酶制剂评价方法存在的问题及对策 饲用酶事业部： 李玉林 2012 ? SUNSON Corporation 如何快速评价和选用饲用酶制剂 常规酶活 在规定温度、pH值等条件下对规定单一底 检测 物的转化能力 动物饲养 在生产（或模拟生产）条件下，探讨与畜 禽饲养有关的因子对畜禽健康、生长发育 试验 和生产性能等的影响或因子本身作用。 体外消化 模拟动物消化道的环境，在体外进行饲料 的消化试验。 试验 2 常规酶活检测 优势 不足 反应条件与动物消化道 ? 操作简单、快捷 环境差异太大 ? 国家统一标准 ? … … 检测底物与饲料结构差 异太大 ? 3 动物饲养试验 优势 不足 易受外界环境影响，波 ? 最贴近实际情况 动较大 ? … … ? … … 花费大 ? 4 体外模拟消化实验 优势 不足 胃肠道内的pH值等动态 ? 接近体内环境 变化较难模拟 ? 精确度高，重复性好 ? 简单方便，成本低 ? … … 5 体外模拟消化实验 6 5种复合酶对小麦麸酶解效果的比较 背景 试验方法 结果分析 讨论 结论 7 背景 小麦麸粗蛋白含量高，氨 酶制剂使用误区：盲目追 基酸组成较佳，但由于粗 求酶活，忽略实际应用效 纤维多，难消化。所含阿 果。酶促反应复杂，受多 拉伯木聚糖、β-葡聚糖和 方面影响，而实验室酶活 纤维素等抗营养成分可降 检测底物单一，与原料中 低饲料消化利用率。 底物有着本质的区别。 复合酶制剂在动物消化道 体外评价试验与体内试验 内的作用效果主要受原料 结果有较强的一致性，能 类型、酶系组成、pH值 够在一定程度上反映酶制 及抗内源蛋白酶降解能力 剂的作用效果 等因素影响 8 试验方法 实验组 0 对照 A B C D E 标准曲线 小麦麸 10g 10g 10g 10g 10g 10g 10g 木糖标准曲线、葡萄糖标准曲线 酶 0g 0g 0.1g 0.1g 0.1g 0.1g 0.1g 胃蛋白液 37ml 37ml 37ml 37ml 37ml 37ml 37ml 酶活检测 38℃水浴 5min 3h/5h 3h/5h 3h/5h 3h/5h 3h/5h 3h/5h 木聚糖酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶 加NaOH调节pH值至5.0以上 4000转离心机中离心10min，取出上清液 还原糖测定 六个实验组、两个时间点、一个零点对照 取一定量上清液至25ml刻度管中补水至4ml，加5mlDNS 沸水浴5min后迅速冷却至室温，定容至25ml 混匀后于分光光度计540nm波长下测吸光度 9 酶系组成及主要酶系活力 样品 A （国外） B （国外） C （国内） D （夏盛） E （夏盛） 组分 木聚糖酶 木聚糖酶 木聚糖酶 木聚糖酶 木聚糖酶 纤维素酶 纤维素酶 纤维素酶 纤维素酶 纤维素酶 β-葡聚糖酶 β-葡聚糖酶 β-葡聚糖酶 β-葡聚糖酶 β-葡聚糖酶 β-甘露聚糖酶 β-甘露聚糖酶 β-甘露聚糖酶 β-甘露聚糖酶 淀粉酶 果胶酶 果胶酶 果胶酶 果胶酶 …… α-半乳糖酶 …… 28904 活 30000 酶 系 25000 酶 要 20000 17293 主 15000 11624 纤维素酶 种 3337 4243 6516 β-葡聚糖酶 三 10000 3479 酶 659 木聚糖酶 合 5000 238 2389 3609 复 0 504 2337 种 478 5 A （国外） 510 B （国外） C （国内） D （夏盛） E （夏盛） 10 还原糖生成量 3.50% 3.13% 3.00% 2.50% 2.50% 2.07% 2.00% 1.97% 1.50% 1.19% 1.15% 1.21% 1.18% 1.00% 0.50% 0.43% 0.27% 0.00% 3h 5h 11 五种非常规饲料原料降解效果比较 3小时D、E样品对五种原料的酶解效果比较 5小时D、E样品对五种原料的酶解效果比较 2.50% 3.50% 3.13% 1.97% 3.00% 2.00% 2.50% 1.50% 2.00% 1.15% D D 1.47% 1.00% 1.00% E 1.50% 1.18% E 0.63% 1.00% 0.79% 0.50% 0.41% 0.40% 0.30% 0.34% 0.47% 0.45% 0.38% 0.25% 0.25% 0.50% 0.37% 0.16% 0.12% 0.00% 0.00% 稻壳 棉粕 DDGS 米糠 小麦麸 稻壳 棉粕 DDGS 米糠 小麦麸 12 体外消化试验 -模拟消化道内温度、pH、消化液分泌