毛细管电泳测多种靶dna及小分子化合物.pdfVIP

毛细管电泳检测多种靶DNA及小分子化合物的研究 摘要 木工作将毛细管电泳一电化学检测技术引入靶DNA分析中，将辣根过氧化物 酶(HRP)催化过氧化氢(H202)氧化邻氨基酚的酶促反应与其氧化产物的电极还原 相偶合，利用毛细管电泳电化学检测技术I、日J接检测邻氨基酚．H202．辣根过氧化物 酶(HRP)体系中的HRP含量。在此基础上引入生物素．亲合素系统，通过毛细管电 泳安培法进行分离检测21个、39个、80个碱基的靶DNA。 第一章为绪论，介绍了毛细管电泳技术的发展和研究现状以及本课题的意 义；第二章介绍了毛细管电泳电化学l日J接检测HRP的情况；第三章用毛细管电泳 电化学检测21个、39个、80个碱基的靶DNA；第四章用毛细管电泳电化学检测 小分子化合物腺苷；第五章用毛细管电泳电化学发光检测腺苷。 在最传反应条件下，测定游离HRP检测限为1．09x10。12 mol·L．1(S／N=3)，线性 范围为2-3×10。12—3．5×10。10mol·L．1。 利用此方法成功应用于检测21个碱基的靶DNA，测定线性范陶为 x10。10 最优化的情况下，可以达到通过毛细管电泳安培法对21个碱基的单链DNA进行 分离检测。 利用此方法成功应用于检测39个碱基的靶DNA，测定线性范围为 x10。o 5．0x1011_1．2x10一m01．L～，检测限为2．4x10。11mol·L。1(S／N=3)。对1．0 mol·L以的39个碱基ssDNA进行7次平行测定，相对偏差为6．4％。在实验条件最 优化的情况下，可以达到通过毛细管电泳安培法对39个碱基的单链DNA进行分 离检测。 利用此方法成功应用于检测80个碱基的靶DNA，测定线性范围为 x10。11 x10。10 5．O×10。11．1．0×10一m01．L-1，检测限为3．0mol·L。1(S／N=3)。对1．0 优化的情况下，可以达到通过毛细管电泳安培法对80个碱基的单链DNA进行分 离检测。 利用此方法应用于同时检测21个、39个、80个碱基的单链DNA，成功实现 了同时进行多个单链DNA的分离检测。 利用毛细管电泳电化学方法成功应用于检Nd,分子化合物腺苷，通过实验， kV 本文得m运用2．5×10～mol·L。18．6的Tris缓冲液，10kV作为分离电压，12 pH 和5s作为进样电压和进样时间可以对腺苷进行分离。 利用毛细管电泳电化学发光法成功应用于检测腺苷，通过实验，本文得出运 用0．04mol·L‘1 7．40的PBS缓冲液，12 kV和5 pH kV作为分离电骶，15 s作为进 样电压和进样时间，1．2 V作为榆测电势可以对腺二苷I进行分离，灵敏度达到1X108 m01．Ijl。 关键词：毛细管电泳电化学榆测适体DNA腺苷 H STUDIES0NCAPILLARYELECTROPHORETICWITH ELECTROCHEMICAL DETECTIoNFORⅣrL，埘PLEDNA TARGETSAND ADENOS烈E ABSTRACT Capillary enzyme withelec